بررسي پپتيدهاي ضد باكتريايي گياه Medicago sativa در مراحل گوناگون رشد

Evaluation of antibacterial peptides in Medicago sativa plant in different satges of growth

در پژوهش حاضر، روند تولید یا رهایش پپتیدهای ضد باكتریایی گیاه Medicago sativa در مراحل گوناگون رشد گیاه، از بذر تا قبل از گل دهی بررسی شد. بدین منظور از مراحل مختلف رشد گیاه نمونه برداری شده و سپس وجود مواد ضد باكتریایی با استفاده از روش های انتشار از دیسك و چاهك و تعیین كم ترین غلظت مهار كننده رشد با استفاده از محیط كشت مایع در حجم كم، بررسی گردید. بدین منظور دو باكتری مدل گرم مثبت و دو باكتری مدل گرم منفی به كار رفتند. سپس نیم رخ پروتئین های ترشح شده از بذرها در مراحل مختلف رشد و جوانه زنی بذر در فواصل زمانی مشخص، به روش SDS-PAGE بررسی شد. در انتها روش Agar-overlay به منظور تایید هویت پپتیدی مواد ضد باكتریایی موجود در مایع رویی بذرهای در حال رویش به كار رفت. بر اساس نتایج آزمایش های ذكر شده مشخص شد كه بذر گیاه MedicagO Sativa در مراحل مختلف جوانه زنی دارای پپتیدهای ضد باكتریایی است كه عمدتا به شكل ذاتی در بذر وجود داشته و به تدریج در محیط رشد بذر رها می گردند. بررسی اثرات ضد باكتریای نمونه های اندام هوایی تا این بخش از پژوهش نیز حاكی از ضعیف بودن چنین ثراتی بود كه می تواند نشان دهنده نبود پپتیدهای ضد باكتریایی در اندام هوایی گیاه باشد و نیاز به بررسی های بیشتری دارد.Agar-overlay به خوبی توانست ماهیت پپتیدی مواد ضد باكتریایی موجود در بذرها را تایید كند.

In this study production and release of antibacterial peptides from M. sativa seeds were investigated and the presence of such peptides in shoot and root were evaluated. Sampling were done in different stages of growth and ther after antibacterial properties of different samples were examined by disk and well diffusion method, determination of MIC and agar overlay assay. According to the results of whole work it was concluded that M.sative has antibacterial peptids which are precent in plant seed as a defence mechanism. It seems that Shoot and root of the plant donʹt have such peptides. Finally agar-overlay assay could confirm the peptide entity of the antibacterial substances of the plant seeds