تخليص آنزيم سلولاز از باكتري Bacillus pumilus با استفاده از روش كروماتوگرافي تعويض يوني

Purification of carboxymethylcellulase from a native strain of Bacillus pumilus

باكتری Bacillus pumilus جمله باكتری هایی است كه توانایی تكثیر در بافت های گیاهی را دارد و در این باكتری تحقیق از خاك های جنگلی جداسازی شد. این باكتری قادر به تولید یك كربوكسی متیل سلولاز با پایداری قابل ملاحظه است. آنزیم تولید شده، توسط ستون كروماتوگرافی تعویض یونی، تخلیص گردید. وزن مولكولی آنزیم خالص با استفاده از ژل 71kDa SDS PAGE تخمین زده شد.این آنزیم توانایی تجزیه كربوكسی متیل سلولز را دارد و فعالیت ویژه آنزیمی آنزیم خالصی برابر با 330U/mg می باشد كه نسبت به سایر نمونه های بررسی شده فعالیت بالاتری را نشان می دهد. این آنزیم توانایی هیدرولیز سوبستراهای طبیعی را دارد و می تواند در خوراك دام و تجزیه مواد لیگنوسلولزی تیمار شده كاربرد داشته باشد.

Bacillus pumilus is one of the Endophytes microorganisms that was isolated from the forest soil .This isolate was able to produce a very thermostable extracellular endoglucanase in the culture broth that hydrolyzed carboxymethylcellulose.This protein was purified by anion exchange chromatography methode.The molecular weight of the purified enzyme was estimated to be about 71 kDa with the analysis of SDS-PAGE and its specific activity is about 330U/mg that is higher than other similar species. Since this enzyme could degrade native substrates such as straw and wheat bran, it has potential application in animal feed and hydrolysis of the lignocellulosic material