مطالعه فعاليت آنزيم هاي دفاعي و H2O2 درگياهان باززايي شده از ريشه مويين توتون

Study of defense enzymes activity and H2O2 in regeneration plants of hairy roots in tobacco

تراريختي فطعات جدا كشت گياهان با اگروباكتريوم رايزوژنز يا ژن هاي rol موجود در ناحيه T-DNA موجب القا ريشه مويين مي گردد. تراريختي بافت ها توسط اين باكتري يا ژن هاي rol موجود در ناحيه T-DNA در اغلب موارد با افزايش توليد متابوليت ثانويه در ريشه موئين همراه است. مطالعات اندكي از باززايي گياهان حاصل از ريشه مويين و تاثير اين ژنها بر ويژگي آنزيمي صورت گرفته است. در مطالعه حاضر اثر ژن هاي rol از T-DNA اگروباكتريوم بر ميزان فعاليت آنزيمي، الگوي ايزوزايمي و ميزان H2O2 دو لاين باززايي شده از گياه توتون مطالعه شد. فعاليت آنزيم هاي پر اكسيداز(POX) و سوپراكسيد ديسموتاز(SOD) واسكوربات پراكسيداز (APX) در دولاينTLaوTLb بيشتر از گياه غيرتراريخت بود. الگوي ايزوزايمي پر اكسيداز يك باند اضافي و ايزوزايم هاي سوپر اكسيد ديسموتاز دو باند اضافي نسبت به گياه غيرترنسفرم نشان داد كه با فعاليت بيشتر آنزيم ها مطابقت دارد. ميزان H2O2 در گياهان ترنسفرم كمتر ازگياهان شاهد بود. كاهش در مقدار H2O2 مي تواند به واسطه افزايش ميزان آنزيم هاي آنتي اكسيدان باشد. نتايج نشان دادT-DNA اگرو باكتريوم رايزوژنز و احتمالا ژن هاي rol سيستم دفاعي آنتي اكسيدان را فعال نموده تا ميزان ROS هاي فعال اكسيژن را براي بقاي گياه كاهش دهد.

It was shown that transformation of tissues with A.rhizogenes, as well as transformation with rol genes, induce the hairy roots, but little is known about effect of rol gene on defense system of plants. In the present work, the effect of rol genes of A. rhizogenes on antioxidant enzymes activity and pattern of peroxidase (POX) and superoxide (SOD) dismutase isozymes in two lines (TLa, TLb) of regenerated plants were studied. SOD, POX and APX activities in TLa and TLb, increased compared with the control. Isozymes pattern were shown an extra band in peroxidase and two extra bands in superoxide dismutase in TLa and TLb lines in comparison with untransformed plants. H2O2 content in transformed plants was lower than untransformed plant. Rise in SOD, POX and APX activities and decresed level of H2O2 in the transformed lines indicates that,TDNA and probably rol genes expression of T-DNA in A. rhizogenes activates defense system in plants.