تعيين جنسيت ماهي قزل آلاي رنگين كمان بوسيله توالي يابي منطقه حفاظت شده كروموزوم y (sdy)

نمونه گيري به طور تصادفي از 20 عدد ماهي قزل آلاي رنگين كمان از بازار شهرداري رشت و بازار روز تنكابن در فصل زمستان در دي ماه تهيه شدند و هيچ يك از ماهي ها بالغ نبودند و هيچگونه علايم ظاهري كه مبني بر تشخيص جنسيت باشد را نشان ندادند. قسمتي از باله دمي هر يك از نمونهها جداگانه درون ميكروتيوپ 5/ 1 ميلي ليتري حاوي الكل 96 درصد قرار گرفت. براي نگهداري بهتر، نمونهها تا شروع مرحلهي استخراج در فريزر 80- درجه سانتيگراد قرار گرفتند. استخراج DNA با استفاده از كيت (شركت روچ آلمان، كد 11796828001) انجام گرديد. به منظور بررسي كميت و كيفيت DNA استخراج شده از روشهاي اسپكتروفتومتري و الكتروفورز ژل آگارز 1% استفاده شد. شرايط چرخه دمايي و مشخصات داده شده به دستگاه ترموسايكلر براي واكنش زنجيرهاي پليمراز به ترتيب مرحله جداسازي 95 – 94 درجه سانتيگراد به مدت 30 ثانيه، مرحله اتصال پرايمرها به هدف در 58 درجه سانتيگراد به مدت 30 ثانيه، مرحله بسط پرايمر 72 درجه سانتيگراد، 10 دقيقه براي 35 چرخه بهينه سازي گرديد. محصول PCR بر روي ژل آگارز الكتروفورز شد و سپس از ژلها عكسبرداري شد. ژن تعيين جنسيت sdy كه بروي كروموزوم Y واقع شده است نشاندهنده نرينگي در ماهي قزل آ لاي رنگين كمان دارد. از انجاييكه قزل آ لاي رنگين كمان از دستگاه تعيين جنسيت (XX/XY) پيروي ميكند 9نمونه هترو گامتيك(XY) هستند و جنسيت آن ها نر خواهد بود. و بقيه نمونه ها چون اين نور فلورسانس را نشان ندادند عدم وجود ژن SDY , و عدم وجود كروموزوم Y را نشان مي دهند بنابر اين نمونه هايكه تعداد 11 عدد بودند نمونه هاي هموگامتيك(XX) جنس ماده خواهند بود. اين روش بدون اسيب رساندن به ماهي صورت ميگيرد ؛روشي آسان و سريع خواهد بود و خطاي انساني در اين روش به حداقل ميرسد . در مورد ماهيان با ارزشي كه نمي خواهيم براي تعيين جنسيت به آن ها اسيبي برسد و يا كشته شوند و همچنين حداقل استرس به آن ها وارد شود و همچنين ماهياني با ارزش اقتصادي بالا كه در حال انقراض نيز هستند اين روش تعيين جنسيت پيشنهاد مي شود.