بررسي اثر يون سيانيد بر عملكرد آنزيم لاكتوپراكسيداز شير بز

Effect of cyanide ion on lactoperoxidase activity in goat milk

يون سيانيد يكي از سموم شناخته شده مي باشد كه از طريق مهار آنزيم سيتوكروم اكسيداز زنجيره تنفسي ميتوكندري، باعث خفگي داخل سلولي مي شود. بسياري از گياهان و محصولات گياهي كه به عنوان غذا توسط دام، طيور و آبزيان مصرف مي شوند داراي تركيباتي همچون آميگدالين، لوتاسترالين و لينامارين مي باشند. اين تركيبات جزء گليكوزيدهاي سيانوژنيك محسوب شده زيرا از هيدروليز آنها در بدن يون سيانيد ايجاد مي گردد. علاوه بر اين سيانيد مي تواند از طريق ضايعات و پساب كارخانجات وارد محيط زيست و چرخه غدايي انسان و حيوانات گردد. در اين تحقيق هدف بررسي اثر غلظت هاي مختلف يون سيانيد بر روي فعاليت آنزيم لاكتوپراكسيداز در شير بز مي باشد. جهت اين عمل ابتدا آنزيم لاكتوپراكسيداز بصورت جزئي از طريق چربي زدايي و سپس با استفاده از تغيير pH محيط (نقطه ايزوالكتريك) از شير بز تخليص گرديد. سپس pH بهينه آنزيم از طريق بررسي فعاليت آنزيم در pH هاي مختلف در حضور سوبستراهاي ABTS و پراكسيدهيدروژن در طول موج 412 نانومتر تعيين شد. براي بررسي اثر يون سيانيد بر فعاليت آنزيم، غلظت هاي مختلف يون سيانيد در محيط واكنش آنزيمي اضافه و در زمان هاي مختلف فعاليت آنزيم بررسي گرديد. مقدار يون سيانيد كه باعث كاهش 50 درصدي فعاليت انزيم لاكتوپراكسيداز گرديد به عنوان IC50 سيانيد در نظر گرفته شد. نتايج نشان داد كه اتصال يون سيانيد به آنزيم لاكتوپراكسيداز بصورت وابسته به زمان نبوده و فقط از الگوي وابسته به غلظت تبعيت مي نمايد بطوري كه ميزان IC50 آن برابر با 8/ 57 ميكرومولار بدست‌ آمد. با توجه به اينكه قدرت اتصال يون سيانيد به آنزيم مربوطه بسيار بالا مي باشد لذا بايد از آلوده شدن غذاي دام به يون سيانيد حتي در غلظت هاي بسيار كم جلوگيري نمود.