بررسي اثر كشندگي نانوذرات حاوي كوركومين براي جدايه هاي مقاوم به فلوكونازول كانديدا آلبيكنس و بيان ژن CDR1

Cytotoxicity effect of curcumin nanoparticles on fluconazol resistant strains of Candida albicans and evaluation of CDR1 gene expression

كانديدا آلبيكنس به عنوان يك پاتوژن قارچي مهم در انسان شناخته شده است. محدوديت هاي موجود در درمان عفونت هاي قارچي مانند عوارض جانبي داروها و مقاومت دارويي باعث توجه محققان به داروهاي جديد خصوصاً داروهاي گياهي شده است. كوركومين به عنوان يك داروي گياهي داراي خواص ضد التهابي و ضد سرطاني است كه امروزه محققان به بررسي عملكرد ضد ميكروبي آن مي پردازند. هدف از اين مطالعه بررسي پتانسيل ضد قارچي نانوذرات حاوي كوركومين، در برابر سويه هاي باليني كانديدا آلبيكنس در تركيب با آنتي بيوتيك فلوكونازول بود. در اين تحقيق، 23 سويه باليني كانديدا آلبيكنس از بيماران مبتلا به عفونت كانديدايي در شهر رشت جداسازي شد. پس از تعيين آنتي بيوگرام به روش ديسك ديفيوژن و تعيين MIC، 20 جدايه مقاوم به فلوكونازول، توسط فلوكونازول به تنهايي و در تركيب با نانوذرات حاوي كوركومين تيمار شدند. فعاليت ضد ميكروبي نانو ذرات حاوي كوركومين به روش MFC بررسي شد. پس از استخراج RNA و سنتز cDNA، بيان CDR1 در سلولهاي تيمار شده و تيمار نشده با نانوذرات حاوي كوركومين و فلوكونازول بررسي شد. 9%/86 از جدايه ها به فلوكونازول مقاوم بودند و بالاترين مقاومت براي فلوكونازول در2048 ميكروگرم بر ميلي ليتر تعيين شد. هم چنين تجزيه و تحليل Q-RT-PCR نشان داد كه نانوذارت حاوي كوركومين به همراه فلوكونازول منجر به كاهش در بيان ژن CDR1و افزايش تاثير فلوكونازول بر جدايه هاي مقاوم گرديد. تايج ما نشان داد كه نانوذارت حاوي كوركومين مي توانند مانع رشد قارچ از طريق مكانيزم هاي مختلف از جمله كاهش بيان CDR1 در تركيب با دوز پايين تر ازMIC (1/2MIC) فلوكونازول گردند.

Candida albicans is known as one of the opportunistic human fungal pathogens. Restrictions in the treatment of fungal diseases such as side-effects of drugs and drug resistance have led researchers to new drugs, especially herbal medicines. curcumin as an herbal drug has anti-inflammatory and anti-cancer properties that nowadays researchers survey its antimicrobial function. The aim of this study was to investigate the anti-fungal potential of curcumin nanoparticles, against clinical isolates of Candida albicans in combination with fluconazole. in this study, 23 clinical strains of Candida albicans was isolated from patients in rasht. After determination of antibiogram by disc diffusion and MIC methods, 20 fluconazole resistant isolates were treated by fluconazole only and in the combination with curcumin nanoparticles. Antimicrobial activity of nano-curcumin was assessed by MFC method. After RNA extraction and cDNA synthesis, CDR1 expression investigated in treated and untreated cells by curcumin nanoparticles and fluconazole.86.9% of isolates were resistant to fluconazole and the highest resistance to fluconazole was determined in 2048 μg/ml. Also Q-RT-PCR analysis revealed that curcumin nano-particles in combined with fluconazole led to downregulation of CDR1, subsequently increase of fluconazole efficiency in resistance isolates. our results suggested that curcumin nanoparticles could be inhibits fungal growth through different mechanism such as CDR1 downregulation in combination with a lower dose of fluconazole (1/2 MIC).