شماره ركورد كنفرانس :
4309
عنوان مقاله :
بهينه سازي روش استخراج DNA به صورت ساده، ايمن و مقرون به صرفه براي كاكتوس و گياهان موسيلاژي سرشار از متابوليت هاي ثانويه
عنوان به زبان ديگر :
OPTIMIZATION DNA EXTRACTION BY SIMPLE, SAFE AND COST-EFFECTIVE METHOD FOR CACTUS AND MUCILAGE PLANTS RICH IN SECONDARY METABOLITES
پديدآورندگان :
خليفه سلطاني مائده sh.soltani1990@gmail.com دانشجو، كارشناسي ارشد بيوتكنولوژي كشاورزي، گروه بيوتكنولوژي، دانشكده علوم وفناوري هاي نوين، دانشگاه تحصيلات تكميلي صنعتي و فناوري پيشرفته كرمان , تركيان مهران m.torkian@ag.iut.ac.ir دانشجو، دكتراي اصلاح نباتات،گروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشكده كشاورزي، دانشگاه صنعتي اصفهان , باقي زاده امين a.baghizadeh@kgut.ac.ir دانشيار، دكتراي ژنتيك بيومتري و بيوتكنولوژي گياهي، گروه بيوتكنولوژي،پژوهشگاه علوم و تكنولوژي پيشرفته، دانشگاه تحصيلات تكميلي صنعتي و فناوري پيشرفته كرمان
كليدواژه :
كاكتوس , استخراج DNA , CTAB-PVP , PCR
عنوان كنفرانس :
سومين كنفرانس ملي علوم و تكنولوژي هاي نوين زيستي
چكيده فارسي :
استخراج DNA با كيفيتبالا و كميت مناسب و كافي از گياه كاكتوس كه حاوي متابوليت هاي ثانويه، تركيبات پلي ساكاريدي و فنولي فراوان مي باشد، دشوار است. چرا كه اين تركيباتDNA را محصور كرده به گونه اي كه با پروتكل-هاي موجود عملا DNA مطلوبي استخراج نمي شود. در گزارشات مبني بر استخراج DNA از گياهان سرشار از متابوليت هاي ثانويه، به دليل استفاده از مقادير فراوان بافت گياهي، مواد شيميايي و آنزيم ها، استفاده از كيت هاي استخراج گران قيمت، تعداد دفعات بالاي سانتريفيوژ و در پي آن تخريب DNA و در نهايت زمانبر بودن و تحميل هزينه هاي فراوان، به دنبال پروتكلي ساده، ايمن، مقرون به صرفه با حفظ كميت و كيفيت DNA، روشي مطمئن براي رفع مشكلات موجود به دست آمد. به اين منظور، با نمونه برداري هدفمند از بافت و اعمال تغييراتي در تركيبات بافر استخراجCTAB ازجمله(3.5%PVP،5% CTAB ،NACL دو مولار)كه به صورت افزايش در ميزان اين تركيبات صورت گرفت و همچنين تيمار جداگانه با سديم كلرايد و ايزوپروپانول به منظور رسوب DNA، پروتكلي مناسب براي اين قبيل گياهان با بافت موسيلاژي بهينه شد.DNA استخراج شده بوسيله اين روش براي كاربردهاي بعدي مانند PCR مناسب بود.
