جداسازي، تعيين ماهيت و ارزيابي توانايي جذب سلولي ميكرووزيكول هاي مترشحه از سلول هاي بنيادي مزانشيمي

پيش زمينه: ميكرووزيكول هاي مشتق از سلول به عنوان مكانيسمي نوين در زمينه ارتباطات سلول- سلول شناخته مي شوند. اگزوزوم هاي مشتق از سلول هاي بنيادي مزانشيمي به عنوان مكانيسمي نوين در زمينه عملكرد پاراكراين سلول هاي بنيادي مزانشيمي قلمداد مي شوند. در اين راستا، اگزوزوم ها نقشي مهم در ارتباطات بين سلولي مابين سلول هاي بنيادي مزانشيمي و سلول هاي توموري بر عهده دارند. روش ها: اگزوزوم ها از محيط كشت سلول هاي بنيادي مزانشيمي توسط سانتريفيوژ افتراقي تخليص شد. اندازه و مرفولوژي اگزوزوم هاي مشتق از سلول هاي بنيادي مزانشيمي توسط ميكروسكوپ الكتروني نگاره بررسي شد. همچنين، اندازه اگزوزوم ها توسط تفرق ديناميكي نور سنجيده شد. آناليز وسترن بلات براي ماركر اگزوزومي CD9 انجام يافت. اگزوزوم هاي تخليص شده با رنگ فلئورسنت PKH ليبل شدند. سلول هاي توموري با اگزوزوم هاي ليبل شده تيمار شد و جذب سلولي توسط ميكروسكوپ فلئورسنت بررسي شد. يافته ها: ميكروسكوپ الكتروني نگاره نشان داد كه اگزوزوم هاي مشتق از سلول هاي بنيادي مزانشيمي داراي شكلي كروي با قطر مابين 30 الي 100 نانومتر است. همچنين اندازه اگزوزوم ها توسط سنجش فرق ديناميكي نور توزيع اندازه زنگوله اي شكل با بيشينه فراواني 80 نانومتر را نشان داد. آناليز وسترن بلات نيز بيان CD9 (ماركر ويژه اگزوزومي) در اگزوزوم هاي تخليص شده را نشان داد. همچنين، بررسي ميكروسكوپ فلئورسنت نشان داد كه اگزووزم هاي ليبل شده با رنگ PKH26 مي توانند توسط سلول هاي توموري با كارامدي بالا جذب شوند. نتيجه گيري: اگزوزوم هاي ترشح شده توسط سلول هاي بنيادي مزانشيمي به عنوان مكانيسمي نوين در زمينه اثرات پاراكراين سلول هاي بنيادي مزانشيمي در ميكرومحيط تومور به شمار مي آيند. توانايي در مطالعه بيولوژي جذب اگزوزوم ها توسط سلول هاي سرطاني فرصت هاي جديدي در زمينه بررسي هاي عملكردي اين نانووزيكول هاي طبيعي و محتويات آن ها در زمينه درمان سرطان فراهم مي آورد.