شماره ركورد كنفرانس :
4357
عنوان مقاله :
بررسي مولكولي گياهان نسل اول ترانس پلاستوميك توتون (Nicotiana tabacum) بيان كننده ژن هاي مسير بيوسنتزي PHB و crtPA
پديدآورندگان :
رستمي مهناز Mahnaz.r91@gmail.com دانشگاه تربيت مدرس، تهران , جلالي جواران مختار دانشگاه تربيت مدرس، تهران , حفيظي اكرم دانشگاه تربيت مدرس، تهران , محمدين فرزانه دانشگاه تربيت مدرس، تهران
كليدواژه :
كشاورزي مولكولي , پلي هيدروكسي بوتيرات , تخليص , PCR
عنوان كنفرانس :
1st interntional congress on biotechnology of medicinal plants and mushrooms
چكيده فارسي :
معرفي گياهان به عنوان امنترين و ارزانترين سيستم توليد پروتئينهاي نوتركيب در كشاورزي مولكولي، نيازمند شناسايي روش تخليص ارزان قيمت ميباشد. امروزه مسئله سطح بيان پايين پروتئينهاي نوتركيب با استفاده از تكنولوژي تراريختي ژنوم كلروپلاست برطرف گرديده و حتي منجر به بيان سطوح بالاي پروتئينهاي پيچيده شده است. فعال كننده پلاسمينوژن بافتي نوتركيب (crtPA) براي از بين بردن لخته هاي خوني حاصل از سكته هاي مغزي استفاده مي شود. به تازگي اتصال پروتئين هدف به ذرات پليهيدروكسيبوتيرات (PHB) جهت كمك به تاخوردن مناسب و تسهيل در تخليص ارزان پروتئين نوتركيب crtPA از گياه گزارش شده است. از آنجا كه توليد گياهان تراريخته كه تا نسل هاي متوالي قادر به حفظ ژنوتيپ جديد باشند و بتوانند به خوبي رشد كنند از اهداف برنامههاي كشاورزي مولكولي مي باشد، هموپلاسم بودن گياهان توليدي جهت عدم خروج اپرون AH1 و برگشت ژنوم كلروپلاست گياه ترانسپلاستوميك به حالت وحشي، اطمينان از پايداري بيان و حفظ ژنوتيپ جديد توليد شده از اهميت بالايي برخوردار است. در اين پژوهش بذور ترانسپلاستوميك نسل T0 گياه AH3 كه حاوي ژنهاي مسير PHB و crtPA است، به همراه بذر گياه غيرتراريخته كشت شدند. بعد از طي شدن دوره رشدي مناسب آناليز هموپلاسمي گياهان ترانسپلاستوميك با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي و بهرهگيري از تكنيك واكنش زنجيرهاي پليمراز بررسي گرديد، نتايج حاصل درج اين ژن را در ژنوم كلروپلاستي گياهان تاييد كرد. همچنين به منظور بررسي بيان ژن هدف در سطح پروتئين، آزمون‌هاي SDS-PAGE و رنگآميزي Nile-blue انجام شد و نتايج بدست آمده ، بيان اين ژن را در سطح پروتئين تاييد كرد.
