تجزيه و تحليل اتصالات مولكول هاي زيستي با استفاده از روش ترموفورز

فرآينــد اتصــال پروتئين هــا، DNAو ديگــر مولكول هــاي زيســتي نقــش مهمــي در تمــام زمينه هــاي علــوم زيســتي، از فيزيولــوژي گرفتــه تــا پزشــكي و داروســازي ايفــا مي كننــد. بنابرايــن، آناليــز واكنشــهاي بيومولكولــي نــه تنهــا بــه بينــش بنيــادي در زيســت شناســي ســلول منجــر مي شــود بلكــه روش هــاي درمانــي مختلفــي بــراي بيماريهــا ارائــه مي دهــد. ترموفــورز يــك تكنيــك بيوفيزيكــي جديــد اســت كــه امــكان آناليــز كمــي واكنش هــاي بيومولكولــي در محلولهــا در مقيــاس ميكروليتــر را بــا دقــت بــالا فراهــم مي كنــد. ايــن روش برمبنــاي حركــت مولكول هــا در شــيب دمايــي اســت. ايــن پديــده شــديدا بــه خصوصيــات مختلــف مولكــول ماننــد هيدراســيون، انــدازه، بــار و كانفورماســيون بســتگي دارد. ايــن روش مي توانــد بــراي آناليــز هــر نــوع واكنشــي بيــن پروتئيــن هــا / پپتيدهــا، DNA و يــا كمپلكســهاي مولكولــي اســتفاده شــود. بــه منظــور القــاي گراديــان دمــا در طــول آزمايــش MST، ليــزر مــادون قرمــز اســتفاده مي شــود. فلوئوروفورهايــي كــه بــه صــورت كــووالان متصــل مي شــوند و يــا فلوئوروفورهــاي ذاتــي، بــراي تعييــن ميــزان جابــه جايــي مولكولهــا در گراديــان دمــا اســتفاده مي شــوند. برخــي از مزيت هــاي اســتفاده از ايــن روش عبارتنــد از: ســنجش ســريع (در عــرض 15 دقيقــه)، نيــاز بــه حجــم واكنشــي انــدك (4 ميكروليتــر)، ســنجش پروبهــاي داراي برچســب فلوئورسانســي و فاقــد برچســب، محــدوده دمايــي كنتــرل شــده گســترده (20 - 45 ° C) و غيــره ... عــلاوه بــر ايــن، MST كاربردهــاي مختلفــي از جملــه تعييــن اســتوكيومتري اتصــال و نــوع آن، تعييــن دقيــق تمايــل مولكول هــاي زيســتي در واكنش هــا، تجزيــه و تحليــل تاخوردگــي پروتئين هــا، آناليــز ترموديناميكــي واكنش هــاي بيومولكولــي، آناليــز ســينتيك آنزيم هــا و غيــره ... در نتيجــه، بــراي بررســي واكنــش مولكول هــاي زيســتي در محلول هــاي مختلــف، MST نســبت بــه ديگــر روشــهاي رايــج، مزيتهــاي زيــادي دارد.