مطالعات سينتيكي و اسپكتروفلوريمتري آنزيم آلكالن فسفاتاز در حضور قند ريبوز

آنزيم آلكالن فسفاتاز به دست آمده از موكوس روده گاو (BIALP) يك متالوآنزيم همودايمر است كه واكنش هيدروليز غير اختصاصي منواسترهاي فسفريك اسيد به فسفات معدني و الكل را در pH قليايي كاتاليز مي كند. آنزيم آلكالن فسفاتاز روده ي گاو در تشخيص، ايمني شناسي و زيست شناسي سلولي و مولكولي كاربرد گسترده ايي دارد از اين رو تغيير در فعاليت و صورتبندي آن به عنوان يك هدف دنبال مي شود. در اين مطالعات فعاليت و همچنين صورتبندي آنزيم آلكالن فسفاتاز در حضور قند ريبوز از طريق مطالعات سينتيكي و فلوريمتري مورد بررسي قرار گرفت. نتايج حاصل از مطالعات سينتيكي بيان مي كند كه قند ريبوز منجر به كاهشVmax و افزايشKm شده، بنابراين به عنوان يك مهاركننده ي مخلوط) غيررقابتي – رقابتي) بر فعاليت آنزيم اثر گذاشته و به محلي غير از جايگاه فعال آنزيم متصل شده است. مطالعات صورت گرفته برشدت فلورسنس آنزيم در غلظت هاي مختلف ريبوز نيز نشان مي دهد كه ريبوز در اين غلظت ها باعث شده تا نشر در طول موج هاي بلندتر (redshift) و با شدت كم تر صورت بگيرد. در واقع ريبوز باعث نزديك شدن ريشه هاي تريپتوفان آنزيم به سطح شده و به عنوان يك خاموش كننده عمل كرده است. براساس نمودار استرن- ولمركه با افزايش دما شيب نمودار يا ثابت استرن- ولمر) (Kd افزايش يافته و همچنين مقادير ثابت خاموشي(Kq) به دست آمده كه به مراتب كمتر از مقدار حداكثر ثابت خاموشي ديناميك يا M-1S-1 10+10 ×2 هستند، خاموشي صورت گرفته از نوع ديناميك بوده است.