بررسي سينتيكي و فلوريمتري آنزيم اسيدفسفاتاز در حضور نانوذره ي Fe3O4

اسيدفســفاتاز3.1.3.2)EC) يــا اورتوفســفريك مونواســتر، خانــواده اي از آنزيم هاســت كــه هيدروليــز مونواســترازها و انهيدريدهــاي فســفريك اســيد را بــراي توليــد فســفات معدنــي در رنــج 4-7= pH و pH اپتيــم 5 -5/3 در دمــاي 37 درجــه ي ســانتي گراد، كاتاليــز مي كنــد. آنزيــم اســيد فســفاتاز استفاده شــده در ايــن پژوهــش، از منشــأ ســيب زميني شــيرين گونــه ي ايپوماييــا باتاتــاس اســت كــه هومودايمــري بــا وزن مولكولــي تقريبــي 110 كيلــو دالتــون كــه هــر مونومــر آن داراي 473 زيــر واحــد آمينــو اســيدي مي باشــد. در ايــن مطالعــه، تأثيــر نانــوذره ي Fe3O4بــر روي آنزيــم اسيدفســفاتاز بررســي شــد و اثــرات آن هــا بــر فعاليــت ســينتيكي و نيــز شــدت نشــر فلورســانس آنزيــم اسيدفســفاتاز مــورد آزمايــش قــرار گرفــت .در بررســي هاي ســينتيكي، از دســتگاه اســپكتروفوتومتر UV-Vis فارماســيا مــدل Ultrospect 1100Pro-اســتفاده شــد. همچنيــن در آزمايش هــاي فلوريمتــري، از دســتگاه اســپكتروفلوريمتر شــركت شــيمادزو مــدل RF-5301PC اســتفاده گرديــد. مطالعــات ســينتيكي نشــان مي دهــد كــه در حضــور غلظت هــاي مختلــف نانــو ذره ي Km Fe3Oكاهــش و Vmax افزايش يافتــه اســت؛ بنابرايــن ايــن نانــو ذره در ايــن غلظت هــا، فعاليــت آنزيــم را افزايــش داده اســت. مطالعــات بــر روي شــدت نشــر فلورســانس آنزيــم بيــان مي كنــد كــه ايــن نانــو ذره در غلظت هــاي موردنظــر، شــدت نشــر فلورســانس آنزيــم را كاهــش داده اســت بنابرايــن به عنــوان خاموش كننــده بــراي آنزيــم عمــل كرده اســت. بــر اســاس نمــودار اســترن- ولمــر و بــا توجــه بــه مقاديــر ثابــت خاموشــي (Kq) ، خاموشــي صــورت گرفتــه از نــوع اســتاتيك بــوده اســت. پارامترهــاي ترموديناميكــي بــراي Fe3O4، نشــان مــي دهــد كــه برهم كنــش غالــب در اتصــال نانــوذره ي Fe3O4 و آنزيــم، برهم كنــش هيدروفــوب بــوده اســت.