بهبود پايداري حرارتي آنزيم لوسيفراز به كمك روش محاسباتي يكپارچه با هدف ساخت كاوشگرهاي جديد زيستي

آنزيم لوسيفراز در Renilla reniformis قادر به نشر نور در طيف سبز آبي در طول موج حدود 450 تا 500 نانومتر مي باشد و به طور گسترده اي در زيست شناسي مولكولي به عنوان ژن گزارشگر در آزمايشهاي كشت سلول و تصويربرداري از بافت كاربرد دارد اين انزيم در شرايط هوازي قادر به اكسيداسيون سوبستراي كولنترازين به كولنتراميد مي باشد و طي اين فرايند نوري با طول موج خاص نشر مي دهد بيولوميناسنس در مقايسه با ساير روشها، روشي حساس، ساده نسبتا ارزان و غيرتهاجمي جهت بررسي رشد و متاستاز تومور تغييرات ژنتيكي ناحيه توموري و اثر بر بيولوژي تومور مي باشد اين آنزيم در شرايط in vivo پايداري نسبتا خوبي دارد اما در in vivo پايداري نامطلوبي دارد به همين دليل به كمك نرم افزارهاي بيوانفورماتيكي به روش محاسباتي يكپارچه جهش هايي در ساختار اين آنزيم در جهت بهبود پايداري ايجاد شد اثر اين جهشها در واحدهاي غير محافظت شده بيررسي شد. بدين منظور ابتدا توالي آمينواسيدي رنيلا از پايگاه NCBI گرفته شد سپس تغييرات پايداري پس از جايگزيني 6 آمينواسيد در سرور DUET اعمال شد. بررسي ها نشان داد جهش در تريپتون 36 و جايگزيني آن با گلايسين در توالي آمينواسيدي رنيلا سبب پايداري اين پروتيين مي شود. بنابراين، اين موتاسيون در جايگاه محافظت نشده منجر به تغييرات مثبت در پايدراي پروتيين شده و احتمالا ميتواند براي تصويربردراي بيولوميناسنس و ساخت كاوشگرهاي جديد زيستي توسط رنيلا لوسيفراز مفيد باشد.