شناسايي مورفولوژيك و مولكولي و استخراج اسيد چرب از جلبك قهوه اي Sargassum muticum در ساحل اوولي استان بوشهر

Morphological and Molecular Identification and Fatty Acid Extraction of Brown Algae Sargassum muticum from Ooli Coasts, Bushehr Province

هدف از تحقيق حاضر شناسايي مورفولوژيك و بررسي مولكولي جلبك قهوه اي غالب در ساحل اولي بوشهر با استفاده از كليد هاي شناسايي معتبر و توالي ITS2 و ارزيابي محتواي اسيد هاي چرب آنها بود. به اين منظور نمونه برداري از سواحل اوولي در زمستان 1395 انجام شد. شناسايي مورفولوژيك با استفاده از كليدهاي معتبر شناسايي گونه هاي سارگاسوم و مشاهدات ميكروسكوپي انجام شد. در بررسي مولكولي ابتدا ژنوم جلبك ها با روش CTAB تغيير يافته استخراج و سپس با استفاده از آغازگر ITS2 و PCR قطعات ژنومي تكثير يافت. آناليز توالي نمونه هاي جلبك هاي قهوه اي مورد بررسي، توسط نرم افزارهاي Chromas pro، BioEdit و MEGA7 انجام شد. استخراج اسيدچرب با استفاده از روش استاندارد و كروماتوگرافي گازيGC انجام گرفت. نتايج شناسايي مورفولوژيك و مولكولي گونه جلبك قهوه اي Sargassum muticum را با اطمينان 100% مورد تاييد قرار داد. نتايج Blast در NCBI نشان داد گونه ي ‌Sargassum muticum شباهت 100 درصدي به گونه ي همسان درياي چين دارد. 15 اسيد چرب از گونه ي Sargassum muticum استخراج شد. در چربي كل جلبك قهوه اي Sargassum muticum، عمده‌ترين اسيد چرب به ترتيب اولئيك اسيد و كم ترين اسيد چرب مريستيك اسيد بودند. نتايج تحقيق حاضر بيانگر آن است كه ضمن حفظ تنوع زيستي جلبك هاي قهوه اي گونه‌ Sargassum muticum در زيستگاه طبيعي آنها (ساحل اوولي)، مي توان با بهره برداري بهينه و پايدار، از اين منابع ارزشمند دريايي به عنوان مواد اوليه در صنايع دارويي، غذايي و كشاورزي استفاده كرد.

The main objectives of this research were to investigate morphological and molecular identification of dominant brown algae in Ooli coasts of Bushehr using valid identification keys and ITS2 sequencing and to evaluate the fatty acid composition of the species. For this reason, sampling was undertaken during winter 1395 from Ooli coastal areas. Morphological identification was carried out using Sargassum species identification keys and microscopic observations. In molecular investigation, the algal genome was first extracted using modified CTAB method and then amplification of ITS2 genome regions was undertaken by PCR. Sequence analysis of studied brown algae was carried out using genetic softwares of Chromas, BioEdit and MEGA7. Fatty acid extraction was done by standard method and Gas Chromatography. Results of morphological and molecular identification, confirmed Sargassum muticum with 100% confidence. Blast results showed that sargassum muticum had 100% similarity to the same species from China Sea. The amount of 15 fatty acids were extracted from Sargassum muticum. In total fat of this algae species, Oleic acid was in maximum and myristic acid in minimum amount, respectively. Results of this research suggested that considering the conservation of marine biodiversity of Sargassum muticum, it can be possible to utilize these valuable marine resources as primary biomaterials in pharmaceutical, food and agriculture industries in a sustainable way.