كليدواژه :
ميكوريز آربوسكولار , شناسايي مولكولي , تنش شوري , Internal transcribed Spacer (ITS) , Nested PCR
چكيده فارسي :
گياهاني كه ريشه آنها توسط قارچ هاي ميكوريز آربوسكولار كلونيزه مي شوند ٬ بطور معمول نسبت به تنش هاي مختلف ازقبيل شوري تحمل بالاتري دارند، بنابراين جداسازي و شناسايي اين قارچ ها مي تواند جهت توليد كودهاي بيولوژيك برايمناطق مذكور بسيار مفيد باشد. بدين منظور پس از نمونه برداري ريشه و اسپور از ريزوسفر گياهان مورد مطالعه )گندم، جو و برخي از علف هاي هرز( از خاكهاي شور استان هاي يزد، آذربايجان شرقي، قم و مركزي، كل ژنوم گياه و ريزوسفر با روش PCRآشيانه اي دو مرحله اي براي حضور قارچ هاي ميكوريز مورد بررسي قرار گرفت. در مرحله اولPCR از آغازگرهاي اختصاصي قارچ هاي ميكوريزي(LSU-Glom1 and SSU-Glom1 ) و پس از هضم آنزيمي باAlu1 در مرحله دوم PCRاز آغازگرهاي عمومي قارچها(ITS و 4 ITS5) استفاده شد. محصولات مرحله دوم PCR هر نمونه، همسانه سازي و كلني هاي مثبت با آنزيم برشيTaq1هضم شدند. با مقايسه الگوهايRFLP نمونه هاي هضم شده و توالي يابي نماينده هايي از هر الگوي برشي، وجود جنسهايAcaulospora و Glomusدر ريزوسفر نمونه ها مشخص شد. جنس Glomusغالبترين جنس )بيش از 90 درصد( و گونه هاي G. versiforme ، G. intraradices ، (%50) Glomus mosseae,Glomus sp و G. constrictum ،G. fulvum ٬G. sinuosum در جنس مذكور مشاهده شدند. بيشترين تنوع گونه اي در خاك هاي يزد و در گياه گندم مشاهده شد. نتايج نشان داد كه گونه G. mosseae داراي بالاترين سازگاري به شرايط شور در مناطق مختلف كشور مي باشد و لذا مي تواند پس از انجام آزمايشات تكميلي به عنوان كود بيولوژيك در اين مناطق استفاده شود
چكيده لاتين :
Commonly, plant roots colonized by arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) can tolerate different
stresses such as soil salinity. Thereby, identification of the dominant AMF species in the saline soils
and their application as biofertilizer is very useful for increasing crop productivity in such conditions.
For this purpose, sampling was performed from root and rhizosphere of wheat, barley and weeds in
Yazd, East Azerbaijan, Qom and Markazi provinces. The morphological properties of spores of the
isolated AMFs were studied. Then, samples were screened using a two steps nested PCR
methodology. At the first step, AMF-specific primers, including LSU-Glom1 and SSU-Glom1 were
used, followed by Alu1 restriction of PCR products, and then at the second step, the restricted PCR
products were amplified by fungal universal primers (ITS4 and ITS5) for amplification of ITS-rDNA
region. The PCR products were cloned, and restricted by Taq 1. The results of morphological
charectreristics and analysis of the achived sequences and blasting showed that two AMF genus,
including Glomus (more than 90%) and Acaulospora (10%) were domininat. The species G. mosseae
(50%), G. intraradices, G. sinosum, G. constrictum, G. etunicatum, G. versiforme, G. fulvom, and
Glomus sp were identified using molecular strategy. The maximum species diversity was observed in
the fields of Yazd Province and rhizosphere of wheat. Totaly, results of the present study showed that
the species G. mosseae has the highest dominancy and adaptivity in saline conditions, so after
.performing further experiments, it can be used as a source of biofertilizer in such regions