بررسي الگوي بيان microRNA398 در واكنش به تنش شوري در گياه آفتابگردان

Study of microRNA398 expression pattern in response to salt stress in the sunflower

تنش هاي شوري، خشكي و سرما سه تنش محيطي متداولي هستند كه به طور جدي رشد و نمو گياه را در سراسر جهان تحت تاثير قرار مي دهند miRNAها يك كلاس مهم از تنظيم كننده هاي بيان ژن مي باشند كه نسبت به تنش هاي محيطي پاسخ مي دهند. يكي از انواع miRNAها كه در پاسخ به انواع تنشهاي غيرزيستي درگير مي باشد miRNA398 است. در اين مطالعه بيان miR398 در دو بافت برگ و ريشه و دو سطح تنش شوري 75 و 150 ميلي مولار نمك كلريد سديم و شرايط غيرتنش به عنوان كنترل در قالب طرح كاملا تصادفي و در سه تكرار بيولوژيكي بررسي گرديد. تنش شوري در مرحله شش برگي اعمال شد و بعد از 22 ساعت بافت برگ و ريشه برداشت و در ازت مايع فريز شدند RNA با روش Trizol استخراج گرديد و سنتز cDNA با روش stem-loop RT-PCR انجام گرفت؛ و ميزان بيان miR398ه روش qRT-PCR و با استفاده از SYBER GREEN كمي گرديد. در دو بافت برگ و ريشه و هر دو سطح تنش شوري، ميزان بيان miR398 افزايش معني داري(t-Test; p<0.05) نشان داد.

Salinity, drought and cold are three common environmental stresses that seriously impress plant growth around the world. miRNAs are an important class of gene regulators that responds to environmental stresses. miRNA 398 is involved in responses to various abiotic stresses. In this study, miR398 expression was evaluated in leaf and root tissues and two salinity levels 75 and 150 mM NaCl and non-stress conditions as control in a completely randomized design with three biological replications. Salt stress was applied at the six-leaf stage and root and leaf tissue were harvested after 24 h and were frozen in liquid nitrogen. RNA was extracted using Trizol, and cDNA synthesis was performed using stem-loop RT-PCR; and miR398 expression level was quantified with qRT-PCR method using SYBER GREEN. In both leaf and root tissues and two levels of salinity stress, (expression of miR398 increased significantly (t-Test; p<0.05