ﺧﺎﻟﺺ ﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﮔﻮﻧﻪ اي از ﺧﺎﻧﻮاده Selenastraceae از رﺳﻮﺑﺎت ﺑﺴﺘﺮ رودﺧﺎﻧﻪ ﺷﻬﺮﭼﺎي، ﺟﻬﺖ ﻣﻌﺮﻓﯽ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺑﯿﻮاﻧﺪﯾﮑﺎﺗﻮر ﺑﻮﻣﯽ

ﻣﻘﺪﻣﻪ: اﻣﺮوزه ﺑﻪ دﻟﯿﻞ اﻫﻤﯿﺖ ﮐﻨﺘﺮل ﮐﯿﻔﯿﺖ آب ﻫﺎي ﺗﺎﻣﯿﻦ ﮐﻨﻨﺪه ﻣﺼﺎرف ﺷﻬﺮي و ﮐﺸﺎورزي ﺑﺮ ﺳﻼﻣﺖ اﻧﺴﺎن و ﻣﺤﯿﻂ زﯾﺴﺖ از ﻣﯿﮑﺮو ﺟﻠﺒﮑﻬﺎ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺷﺎﺧﺺ ﻫﺎي زﯾﺴﺘﯽ (ﺑﯿﻮ اﻧﺪﯾﮑﺎﺗﻮر) آﻟﻮدﮔﯽ، اﺳﺘﻔﺎده ﻫﺎي زﯾﺎدي ﻣﯽ ﺷﻮد. ﮔﻮﻧﻪ ﻫﺎﯾﯽ از ﺧﺎﻧﻮاده Scenedesmaceae و Selenastraceae از راﯾﺞ ﺗﺮﯾﻦ ﻣﯿﮑﺮوﺟﻠﺒﮑﻬﺎﯾﯽ ﻫﺴﺘﻨﺪ ﮐﻪ ﺣﺴﺎﺳﯿﺖ ﺑﺎﻻ ﺑﻪ ﻣﻮاد ﺷﯿﻤﯿﺎﯾﯽ آﻟﯽ و ﻏﯿﺮ آﻟﯽ دارﻧﺪ و ﺑﻪ ﻫﻤﯿﻦ ﻣﻨﻈﻮر ﻣﻮرد اﺳﺘﻔﺎده ﻗﺮار ﻣﯽ ﮔﯿﺮﻧﺪ. اﯾﻦ ﭘﮋوﻫﺶ ﺑﺎ ﻫﺪف ﺧﺎﻟﺺ ﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﮔﻮﻧﻪ اي ﺳﺎزﮔﺎر ﺑﺎ ﺷﺮاﯾﻂ اﻗﻠﯿﻤﯽ از ﺧﺎﻧﻮاده Selenastraceae ﺟﻬﺖ ﻣﻌﺮﻓﯽ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺑﯿﻮاﻧﺪﯾﮑﺎﺗﻮر ﺑﻮﻣﯽ رودﺧﺎﻧﻪ ﻫﺎي ﺣﻮﺿﻪ آﺑﺮﯾﺰ درﯾﺎﭼﻪ اروﻣﯿﻪ، اﻧﺠﺎم ﮔﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ. ﻣﻮاد و روش ﮐﺎر:ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ از ﮐﻒ ﺑﺴﺘﺮ رودﺧﺎﻧﻪ ﺷﻬﺮﭼﺎي اروﻣﯿﻪ ﺑﺮداﺷﺘﻪ و ﭘﺲ از اﻧﺘﻘﺎل ﺑﻪ آزﻣﺎﯾﺸﮕﺎه، ﺑﻪ ﻃﻮر ﮐﺎﻣﻞ ﺧﺸﮏ ﺷﺪ. ﭘﺲ از ﻏﺮﺑﺎل از ﻓﯿﻠﺘﺮ دو ﻣﯿﻠﯿﻤﺘﺮي، دو ﮔﺮم از رﺳﻮﺑﺎت ﺧﺸﮏ ﺑﺎ اﻓﺰودن ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﮔﯿﻼرد و آب ﻣﻘﻄﺮ در ارﻟﻦ ﻫﺎي 250 ﻣﯿﻠﯽ ﻟﯿﺘﺮي در ﻣﻘﺎﺑﻞ ﻧﻮر(ﺑﺎ ﺷﺪت 4500 ﻟﻮﮐﺲ) ﻗﺮار داده ﺷﺪﻧﺪ. ده روز ﺑﻌﺪ، آب روﯾﯽ رﺳﻮﺑﺎت در ﭘﻠﯿﺖ ﻫﺎي ﺣﺎوي ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﺟﺎﻣﺪ ﮐﺸﺖ ﺷﺪ. ﮐﻠﻨﯽ ﺧﺎﻟﺺ از ﮔﻮﻧﻪ ي داراي وﯾﮋﮔﯿﻬﺎي ﻣﻮرﻓﻮﻟﻮژﯾﮏ ﺧﺎﻧﻮاده Selenastraceae، ﻣﺠﺪدا ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﻣﺎﯾﻊ ﻣﻨﺘﻘﻞ و ﭘﺲ از ﮐﺸﺘﻮ ﺣﺼﻮل ﺑﯿﻮﻣﺲ ﮐﺎﻓﯽ ﺑﻪ ﻓﺎز ﺑﺮرﺳﯽ ﻣﻠﮑﻮﻟﯽ وارد ﺷﺪ. DNA، 0.1 ﮔﺮم از ﺑﯿﻮﻣﺲ ﺗﺮ ﻣﯿﮑﺮوﺟﻠﺒﮏ ﺧﺎﻟﺺ ﺷﺪه ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﮐﯿﺖ، اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪه و ﭘﺲ از ﺗﺴﺖ ﺧﻠﻮص ﺑﺎ ﺑﯿﻮﻓﺘﻮﻣﺘﺮ، ﺑﻪ ﻋﻨﻮان اﻟﮕﻮ در ﺗﮑﺜﯿﺮ ﻗﻄﻌﻪ ITS-2 (ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﺎرﮐﺮ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ) ﻣﻮرد اﺳﺘﻔﺎده ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ. ﺗﻮاﻟﯽ ﭘﺮاﯾﻤﺮﻫﺎي ﺑﮑﺎر رﻓﺘﻪ ﺑﻪ ﺷﺮح زﯾﺮ ﺑﻮد: F 5ˊ-GCATCGATGAAGGCAGC-3ˊ , R-5ˊTCCTCCGCTTATTGATATGC-3ˊ ﺑﺮﻧﺎﻣﻪ PCR ﺷﺎﻣﻞ 2 دﻗﯿﻘﻪ 94درﺟﻬﻮاﺳﺮﺷﺖ اوﻟﯿﻪ، ﺳﯽ و ﺷﺶ ﭼﺮﺧﻪ 94 درﺟﻪ 50 ﺛﺎﻧﯿﻪ، 62 درﺟﻪ 38 ﺛﺎﻧﯿﻪ ،72 درﺟﻪ 40 ﺛﺎﻧﯿﻪ، و در ﻧﻬﺎﯾﺖ ﺳﻪ دﻗﯿﻘﻪ 72 درﺟﻪ ﺑﻮد. ﭘﺲ از اﻟﮑﺘﺮوﻓﻮرز و ﺗﺴﺖ ﻗﻄﻌﻪ ﺗﮑﺜﯿﺮ ﯾﺎﻓﺘﻪ روي ژل، ﻣﺤﺼﻮل PCR ﺑﻪ روش ﺳﻨﮕﺮﺗﻌﯿﯿﻦ ﺗﻮاﻟﯽ ﺷﺪ. ﻧﺘﺎﯾﺞ:ﺗﻮاﻟﯽ ITS-2 ﺑﺪﺳﺖ آﻣﺪه در ﭘﺎﯾﮕﺎه داده NCBI ﺑﻼﺳﺖ ﺷﺪه وﭘﺲ از ﺗﺮﺳﯿﻢ درﺧﺖ ﻓﯿﻠﻮژﻧﺘﯿﮑﯽ ﻗﺮاﺑﺖ ﻗﺎﺑﻞ ﻗﺒﻮﻟﯽ ﺑﺎ ﺟﻨﺴﻬﺎي ﺧﺎﻧﻮاده Selenastraceae ﻧﺸﺎن داد.