بهينه سازي توليد IGF-I نوتركيب انساني در كشت غيرمداوم در اشريشيا كلي

هورمون رشد IGF-I يك پلي پپتيد تك رشتهاي 70 آمينو اسيدي با سه پيوند دي سولفيدي است. اين پروتئين به دليل برخي ويژگيها و فعاليت هاي بيولوژيكي از لحاظ باليني كاربردهاي زيادي دارد. در اين پژوهش، توليد و بهينه سازي شرايط بيان پروتئين IGF-I با استفاده از سويهي نوتركيب ] pET15b-hIGF-I ] E. coli OrigamiB(DE3) در كشت غيرمداوم انجام شد. به منظور بهينه سازي شرايط توليد، اثر سه عامل دما (28 و 33 و 37 درجه سانتيگراد) ، مقدار القاگر (mM 0/5-0/3-0/1 ) و نوع محيط كشت ( LB-TB-TB+G ) با روش طراحي آماري آزمايش ها روي مقدار توليد IGF-I بررسي شد. نتايح حاصل از بهينه سازي داده ها نشان داد كه بيشترين مقدار توليد پروتئين IGF-I در دما 28 درجه سانتيگراد و در محيط كشت TB+G است و مقدار القاگر كمترين تاثير را بر توليد پروتئين دارد. در شرايط بهينه در كشت غيرمداوم g/l 0/771 پروتئين نوتركيب با ميزان بيان 38% پروتئين كل بدست آمد. اين مقدار پروتئين يكي از بالاترين مقادير گزارش شده در سيستم غيرمداوم است.