بررسي انتقال و بيان ژن Gus در گياهان تراريخت نسل اول توتون

بررسي مولكولي گياهان تراريخت در سطوح مختلف DNA، RNA، پروتئين و ... طي نسل هاي مختلف يك گام كليدي در توسعه لاين هاي گياهي است كه از نظر ژنتيكي پايدار باشند و سطح بيان ترنسژن در آنها مناسب باشد. در تحقيق حاضر براي آناليز مولكولي نسل T0 گياهان توتون (تراريخت شده با سازه اختصاصي بذر و حاوي ژن Gus) استخراج DNA ژنومي از برگ هاي جوان گياهچه هاي سبزمانده در محيط گزينشگر انجام گرفت. با استفاده ازآغازگرهاي اختصاصي ژن Gus و واكنش PCR،قطعه 1512bp مربوط به ژن Gus مشاهده شد، كه انتقال سازه مدنظر به ژنوم گياه راتاييد مي كند. بررسي بيان ترنسژن Gus در سطح نسخه برداري، نشان دهنده بيان اين ژن در بذر و عدم بيان آن دربافت برگي بود. اين نتيجه با توجه به اينكه پيشبرنده ناپين (كنترل كننده ژن Gus) اختصاصي بذر مي باشد مورد انتظار بود. در نهايت با استفاده از SDS-Page و آزمون هيستو شيميايي Gus، بيان اين ژن در بذر گياهان گزينش شده مورد بررسي قرار گرفت. وجود باند تقريبا 60KD در گياهان تراريخت و نيز نتايج حاصل از آزمون هيستو شيميايي نشان دهنده بيان ژن Gus در بذور تراريخت توتون بود.