ساخت آپتامر شناساگر ترينيتروتولوئن (TNT)

هدف - هدف اين كار تحقيقاتي دستيابي به ترادف آپتامري از DNA است كه بصورت اختصاصي بتواند ترينيتر و تولوئن (TNT) را شناسايي نمايد. روش - با استفاده ار پرايمرهاي اختصاصي و كتابخانه تصادفي از نوكلئوتيدها (دو ترادف 19 و 21 بازي مشخص جهت اتصال پرايمرها و 78 باز تصادفي در وسط)، تكثير قطعات نوكلئوتيدي (PCR) انجام گرفت. به منظور انجام SELEX با استفاده از نانوذرات مغناطيسي و ماده واكنشگر EDC ، تثبيت TNT با استفاده از ماده تجاري TNP-BSA (TNT متصل شده به پروتئين آلبومن) صورت پذيرفت. پس از غربالگري اوليه، مجدد PCR بر روي قطعات جدا شده از نانوذرات و نوكلئوتيدهاي نشاندار با دياكسيژنين (DIG) تكرار گرديد. در ادامه جهت ارزيابي عملكرد آپتامر در شناسايي TNT مورد مطالعه قرار گرفت. در نهايت نيز ترادف مربوطه در پلاسميد pBluescript كلون و تعيين ترادف گرديد. نتيجه تحقيق - آپتامر كلون شده داراي كارايي مناسب در شناسايي TNT بوده و مي تواند به عنوان آپتاسنسور شناساگر TNT در مطالعات آتي استفاده گردد.