ارزيابي قابليت اتصال ناحيه غني از سيستئين در انتهاي آمينوي متالوتيونين تيپ1 برنج(OsMTI-) Ib به فلز كادميوم از طريق حذف ناحيه غني از سيستئين در انتهاي كربوكسي

متالوتيونين ها (MT) پروتئين هايي غني از سيستئين هستندكه از طريق گروه تيول آمينو اسيدهاي سيستئين به فلزات متصل مي شوند. مشخصه ي پروتئين هاي تيپ 1، 2 و 3 MT گياهي وجود دو دمين غني از Cys دردوانتهاي آمينو و كربوكسي پروتئين است كه توسط يك ناحيه فاصله اندازعاري از Cys از هم جدامي شوند. مطالعات قبلي نشان داده كه تيپ1 متالوتيونين گياهي قابليت اتصال به فلزاتي مانند كادميوم را دارند، اما تاكنون قابليت اتصال هر انتها به طور جداگانه و مستقل از هم مورد بررسي قرار نگرفته است. در اين مطالعه به منظور بررسي نقش انتهاي آمينو درقابليت جذب فلز فقط قسمتي از ژن كه ناحيه انتهاي آمينو را كد مي كند (N-OsMTI-1b ) با استفاده از PCR تكثير شد. محصول حاصل در پلاسميد pET41a همسانه سازي و به باكتري E.coli سويه Rosetta(DE3) منتقل شد. بيان هترولوگ N-OsMTI-1b مورد تاييد قرارگرفت و خالص سازي شد. باقرار دادن فرم نوتركيب و خالص OsMTI-1b و N-OsMTI-1b در معرض كادميوم و واكنش DTNB با پروتئين هاي انكويه شده قابليت جذب با كادميوم در شرايط اين ويترو براي دو پروتئين نو تركيب OsMTI-1b و N-OsMTI-1b بررسي شد. به نظر مي رسد ناحيه انتهاي آمينو در اين پروتئين به طور مستقل از ناحيه انتهاي كربوكسي نيز قابليت اتصال به كادميوم را دارد.