بهينه سازي تراريزش در ريزجلبك با استفاده از ژن گزارشگر GUS به منظور توليد پروتئين نو تركيب

ريز جلبكها به علت مزيت هايي كه نسبت به ديگر موجودات مدل دارند . ميزبات هاي كانديد ايده ال براي توليد پروتئين نو تركيب هستند و مي توانند براي توليد بسياري محصولات تراريخته شامل بسياري از پروتئين هاي دارويي استفاده شوند . در اين تحقيق به منظور بررسي امكان انتقال ژن به هسته ريز جلبك، سويه هاي Chlamydomonas reinhardtii و Dunaliella salina به وسيله الكتروپوريشن با وكتور بياني pBI121 تراريخت شدند . اين پلاسميد حاوي ژنهاي بتاگلوكورونيداز (GUS) با پيشبر ويروس موزائيك گل كلم CaMV35S و نئومايسين فسفوترانسفراز (nptII) با پيشبر Nos مي باشد. براي كشت ريز جبلك ها، سلول ها در محيط كشت مايع در دماي 25-21 درجه ي سانتي گراد و شدت نور 10 ميكرومول فوتون برم تر متر مربع بر ثانيه با رژيم شبانه روزي 16 ساعت نور و 8 ساعت تاريكي در شيكر انكوباتور قرار داده شدند. بهينه سازي انتقال ژن به ژنوم ريزجلبك، فراهم آوردن زمينه توليد پروتئين دارويي در سيستيم ريز جلبك، تعيين سويه مناسب براي توليد پروتئين دارويي، تعيين بهترين روش انتقال ژن به ريز جلبك در اين تحقيق مورد برري قرار رفت و د رنهايت مطلوبترين شرايط براي انتفاقل ژن به روش الكرتوپوريشن با گزينش ريز چلبك هاي مقاوم در برابر كانامايسين و انجام آزمون بيان ژن gus و واكنش زنجيره اي پليمر از معرفي شد .