معرفي ژن هاي مرجع براي تجزيه و تحليل qRT-PCR در بافت هاي مختلف گونه هاي Artemisia annua و Artemisia sieberi

دردهه هاي اخير Artemisia annua به خاطر دارا بودن آرتميزيتين كه خاصيت ضدمالاريايي دارد، توجه زيادي را به خود جلب كرده است. به جهت بررسي ميزان تغييرات بيان ژن هاي توليد كننده آرتميزينين، از واكنش زنجيره اي پليمراز كمي در زمان حقيقي استفاده مي گردد. به منظور كنترل خطاهاي مراحل مختلف واكنش Real time PCR ، انتخاب روش دقيقي براي نرمال سازي اهميت دارد كه در اين ميان، استفاده از ژن هاي خانه دار به عنوان كنترل كننده هاي داخلي در آناليزبيان ژن عموميت دارد. در مطالعه حاضر ثبات بيان هفت ژن ,cpr ,pal ,18s rRNA ,act ,ubq،EF1α و rsp9 در بافت هاي مختلف گونه هاي A. annua و A. sieberi بررسي شد. پس از استخراج RNA از سه بافت برگ، ساقه و ريشه، ساخت cDNA انجام گرفت. داده هاي حاصل از واكنش Real time PCR به وسيله نرم افزار NormFinderمورد تجزيه و تحليل قرارگرفت. نتايج حاصل نسان داد كه در ميان بافت هاي گونه A. annua ، ژن هاي pal ، cpr و act معتبر ترين ژن هاي كنترل داخلي هستندو در گونه A. sieberi ژن 18S rRNA به عنوان ژن مرجع مناسب معرفي گرديد. اين نتايج نشان مي دهند كه ژن هاي خانه دار به صورت كاملا متفاوتي در بين گونه هاي مختلف گياهي تنظيم مي شوند و الگوي بياني متفاوتي دارند و اعتبار سنجي آن ها قبل از استفاده ضروري به نظر مي رسد.