شماره ركورد كنفرانس :
4522
عنوان مقاله :
بهينه سازي بيان موقت ژن در گياه اسنفناج به روش آگرواينجكشن با حامل ويروسي PVX
پديدآورندگان :
نوري فريده دانشگاه پيام نور , افقي حميده سازمان پژوهشهاي علمي و صنعتي ايران , احساني پرستو انستيتو پاستور ايران
كليدواژه :
بيان موقت , ناقل ويروسي موزاييك X سيب زميني - اسفناج
عنوان كنفرانس :
هشتمين همايش بيوتكنولوژي جمهوري اسلامي ايران و چهارمين همايش ملي امنيت زيستي
چكيده فارسي :
پروتئين فلور سنت سبز به عنوان ژن گزارشگر ايده آل در مهندسي ژنتيك به منظور بهينه سازي سيستم انتقال ژن و بيان آن كاربرد فراوان دارد . در اين تحقيق بهينه سازي سيستم بيان موقت در گياه Spinaciaolerace با استفاده از زن گزارشگر GFP توسط وكتور ويروسي انجام گرفت . براي اين منظور ژن تقويت شده (Egfp) از وكتور گياهي غير ويروسي PK7WG2D,1 با طراحي آغاز گرهاي مناسب با توجه به توالي هاي دو انتهاي ژن ،محل هاي برشي مناسب، تكثير و پس از جداسازي ، در ناقل بياني PVX همسانه سازي شد . به منظور اطمينان از همسانه سازي، سازه تهيه شده با استفاده از بررسي هاي كلوني PCR، PCR و هضم آنزيمي مورد تاييد قرار گرفت . سازه نهائي pVX-Egfp تاييد شده خاوي ژن Egfp به روش شوك حرارتي به باكتري آگروباكتريوم سويه GV3101 منتقل گرديد و در مرحله آخر انتقال آگروباكتريوم نوتركيب به روش Agroinjection به گياه اسفناج صورت گرفت . بيان موقت پروتئين در برگ هاي اسفناح توسط نور فلورسنس ديده شد .
