تشخيص سريع قارچ Verticillium dahliae عامل بيماري پژمردگي ورتيسليومي درختان زيتون با استفاده از تكنيك LAMP

يكي از عوامل اصلي كاهش عملكردزيتون، وجود طيف وسيعي از عوامل بيماري زاي قارچي است كه با حمله به آن باعث افت كمي و كيفي محصول مي شوند. در بين اين عوامل، قارچ Verticillium dahliae سهم مهمي در ايجاد خسارت در روي محصول زيتون در اغلب مناطق زيتون كاري كشور به خود اختصاص داده است. روش هاي مولكولي متعددي جهت تشخيص اين قارچ در درختان آلوده به كار گرفته شده است كه اغلب مبتني بر PCR هستند. تكنيك LAMP روش جديدي جهت تشخيص بسياري از عوامل بيماري زا به خصوص ويروس هاي آلوده كننده گياهي مي باشد كه در آن تمام واكنش ها، مي تواند تحت شرايط هم دما انجام شود و نيازي به تجهيزات گران قيمت ندارد. در اين پژوهش براي اولين بار از تكنيك LAMP براي تشخيص دقيق و سريع قارچ عامل پژمردگي و رتيسليومي زيتون استفاده شد. براي اين منظور، بعداز كشت قارچ در محيط PDA، استخراج DNA ژنومي انجام شد. سپس با طراحي آغازگرهاي اختصاصي واكنش لمپ و بهينه سازي شرايط واكنش، قارچ عامل بيماري شناسايي گرديد. درادامه دقت و حساسيت اين تكنيك با روش مبتني بر Nested-PCR مقايسه گرديد. نتايج اين پژوهش نشان داد كه روش LAMP در مقايسه با روش Nested-PCR از سرعت، دقت و حساسيت بيشتري در تشخيص قارچ برخوردار است و مي تواند روش جايگزين مناسبي براي روش فوق درغربالگري درختان آلوده به قارچ درباغات زيتون باشد.