تهيه وكتورهاي بيان پروتئين شبه انسولين انساني در كلروپلاست توتون

كلروپلاست هاي ترانسژنيك بيوراكتورهاي بالقوه براي توليد پروتئين هاي نوتركيب، بويژه براي دست يابي به بيان بالا و فولدينگ صحيح پروتئين هاي درماني مي باشند. IGF-1 يك هورمون پلي پپتيدي است كه از 70 اسيد آمينه تشكيل شده، و عمدتا در كبد با تحريك هورمون رشد آزاد مي شود. از آنجاكه از لحاظ ساختاري شبيه انسولين است يك كاهنده قوي قندخون نيز مي باشدو در درمان ديابت شيرين در موارد مقاومت به انسولين نقش دارد. با توجه به اهميت اين پروتئين در سلامت و گسترش روزافزون نياز به آن، ايجاد يك سيستم مناسب براي توليد اين پروتئين در سطوح تجاري و با هزينه پايين بسيار ضروري به نظر مي رسد. بنابراين هدف نهايي اين تحقيق، ايجاد يك سيستم كارآمد براي بيان پروتئين IGF-1 در گياه توتون به عنوان يك گياه مدل با بيوماس بالا مي باشد. براي اين منظور، cDNA ي ژن IGF-1 كه در آزمايشگاه بيوتكنولوژي دانشگاه شهيد مدني آذربايجان از سلول هاي انساني جداسازي شده بود، دروكتورهاي بياني كلروپلاست توتون كلون گرديد. در يكي از وكتورها، ژن گزينش گر بين دو توالي تكراري مستقيم Lox-P جاسازي گرديد كه امكان جداسازي ژن ماركر را در حضور ريكامبيناز Cre فراهم مي كند.