جداسازي باكتري باسيلوس‌ سابتيليس مولد آنزيم فيتاز به عنوان پروبيوتيك براي تغذيه طيور

Isolation of Bacillus subtilis Generating Phytase enzyme as Probiotic for Poultry nutrition

فيتات، فرم اصلي ذخيره‌سازي فسفر در گياه است؛ اما اين نوع فسفر در طيور چندان قابل استفاده نيست. آنزيم فيتاز قادر است كه فيتات را هيدروليز كند و فسفر قابل دسترس آن را براي طيورآزاد كند. هدف از اين مطالعه جداسازي باكتري باسيلوس سابتيليس با قابليت توليد آنزيم فيتاز مي‌باشد كه از آن به عنوان يك پروبيوتيك در تغذيه طيور بتوان استفاده كرد. بدين منظور ﻧﻤﻮﻧﻪ‌هايي از خاك‌هاي آلوده به فضولات دامي، شهرستان شهداد جمع آوري شد و ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ﺑﺎﺳﻴﻠﻮس مولد ﻓﻴﺘﺎز، توسط ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ PSM آﮔﺎر، غربالگيري ﺷﺪﻧﺪ؛ هاله شفاف ايجاد شده اطراف كلني باكتري نشان دهنده توليد فيتاز مي باشد. حفظ هاله شفاف پس از رنگ‌آميزي با آمونيوم موليبدات، نشان داد كه تمام جدايه هاي منتخب توانايي توليد فيتاز را دارند. باكتري SH17-3 با استفاده از رنگ آميزي گرم و تست تشخيص مولكولي و با توجه به فعاليت بالاي آنزيم فيتاز، گرم مثبت بودن، داشتن اسپور، مقاوم بودن نسبت به اسيد و عدم هموليز خون به عنوان پروبيوتيك براي تغذيه طيور انتخاب شد. نتايج هم‌رديفي BLAST در پايگاه داده اي NCBI نشان داد كه توالي ژن 16srRNA باكتري 3-17SH با يكساني 99 درصد با باكتري هاي باسيلوس‌سابتيليس شناسايي شده قبلي مطابقت دارد.

Phytate is the main form of phosphorus storage in plants, But this type of phosphorus is not used in poultry. The phytase enzyme is able to hydrolyze phytate and release available phosphorus for poultry. The aim of this study was to isolate Bacillus subtilis capable of producing phytase enzyme which can be used as a probiotic in poultry nutrition. For this purpose, Samples of soils contaminated with livestock feces were collected from Shahdad city. an‎d Phytase producing Bacillus strains were screened by PSM)phytase screening medium) agar medium. The clear halo zone forming around bacterial colony indicates phytase production. Maintaining a clear halo zone, after staining with ammonium molybdate, confirmed the production of phytase in all selected isolate. Bacterial SH17-3 was selected as a probiotic for feeding poultry, with using gram staining and molecular detection tests, an‎d considering to high activity of phytase, spore resistant, acid-resistant and non-hemolyzed blood.Results of alignment in NCBI database was shown that sequence of 16srRNA belonging to bacteria SH 17-3 had 99 percent identity with Bacillus subtilis which previously was identified