توليد اقتصادي آنزيم پكتيناز از تفاله سيب توسط Bacillus wiedmannii

Economic production of pectinase enzyme from apple pomace by Bacillus wiedmannii

آنزيم هاي پكتينوليتيك يكي از گروه هاي مهم آنزيم هاي مورد استفاده در صنعت فرآوري وشفاف سازي آبميوه ها هستند. از كاربرد هاي پكتينازها ميتوان صنعت نساجي، صمغ زدايي محصولات اليافي، توليد كاغذ، تخمير قهوه و چاي، استخراج روغن و تصفيه فاضلاب اشاره كرد. هدف از اين پژوهش جداسازي گونه هاي بومي باسيلوس از خاك مزرعه سيب و بررسي توانايي توليد آنزيم پكتيناز در آن ها است. در اين تحقيق، ۵ نمونه خاك از مزرعه سيب شهرستان دماوند جمع آوري شد و جداسازي به روش پورپليت و تيمار حرارتي صورت گرفت. به منظور انجام روش غربالگري اوليه بر روي محيط كشت اختصاصي پكتين آگار به صورت كشت نقطه اي كشت داده شد.پس از مشاهده هاله آنزيمي،روش چاهك گذاري انجام شد.رنگ آميزي گرم و ديگر تست هاي بيوشيميايي انجام شد .سپس با استفاده از نمونه منتخب، روش سنجش كمي آنزيم دي نيتروساليسيليك اسيد و بهينه سازي انجام شد.در اين تحقيق ،از ميان ۶۱ گونه باسيلوس ،۶ گونه در مرحله غربالگري اوليه ،۳ گونه در مرحله ثانويه بيشترين قطر هاله را داشتند. گونه باسيلوس با قطر هاله ۲۰ ميلي متر به عنوان بهترين توليد كننده آنزيم انتخاب شد.در بهينه سازي ،منبع كربن ارزان قيمت تفاله سيب با ميزان توليد آنزيم 4/86 واحد در ميلي ليتر و منبع نيتروژن پپتون با ميزان توليد آنزيم 5/94 واحد در ميلي ليتر داراي بالاترين ميزان توليد آنزيم بوده اند.جدايه مجهول با 100 درصد تشابه مربوط به باسيلوس ويدماني است. از پتانسيل سويه هاي باكتري جداسازي شده بومي كشورمان در جهت توليد آنزيم هاي صنعتي مانند پكتيناز، با استفاده از تركيبات ارزان قيمت مانند تفاله سيب ميتوان به ميزان مناسبي از توليد آنزيم پكتيناز دست يافت و اين مطالعه ميتواند دستاوردي در جهت جايگزيني آن با سوبستراهاي گران قيمت در صنعت باشد.

pectinolytic enzymes are one of the important groups of enzymes used in the processing and clarification industry of fruit juices. The applications of pectinases can be mentioned in the textile industry, degumming of fiber products, paper production, coffee and tea fermentation, oil extraction, and wastewater treatment. The purpose of this research is to isolate native species of Bacillus from apple farm soil and investigate the ability to produce pectinase enzyme in it. In this research, 5 soil samples were collected from an apple farm in Damavand city, and separation was done by porplate method and heat treatment. In order to perform the primary screening method, it was cultured on a special pectin agar culture medium as a spot culture. After observing the enzyme halo, the welling method was performed. Gram staining and other biochemical tests were performed. Then, using the selected sample, the quantitative enzyme assay by dinitrosalicylic acid (DNS) method and optimization was performed. In this research, from Among the 61 Bacillus species, 6 species had the largest halo diameter in the primary screening stage and 3 species in the secondary stage. Bacillus species with a halo diameter of 20 mm was selected as the best enzyme producer.In the optimization, the cheap carbon source of apple pomace with the enzyme production rate of 86.4 IU/ml and the nitrogen source of peptone with the enzyme production rate of 94.5 IU/ml have the highest enzyme production rate. Unknown separation with 100% The similarity is related to Bacillus wiedmannii. From the potential of the isolated native bacterial strains of our country to produce industrial enzymes such as pectinase, by using cheap ingredients such as apple pomace, a suitable amount of pectinase enzyme production can be achieved and this study can be an achievement in To replace it with expensive substrates in the industry.