جداسازي و بررسي خصوصيات آنتي‌بيوتيكي باكتري‌هاي پروبيوتيك لاكتوباسيولوس حفره دهاني بر عليه پاتوژن‌هاي گرم مثبت و گرم منفي

Isolation and investigation of antibiotic properties of lactobacillus probiotic bacteria of the oral cavity against gram-positive and gram-negative pathogens

بدن انسان حاوي فلور طبيعي از مجموعه گسترده‌اي از باكتري‌هاي همزيست بوده كه نقش‌ مهمي در فيزيولوژي و متابوليسم بدن بر عهده داشته و در فرايندهاي زيستي مختلفي نظير هضم و جذب مواد مغذي، محافظت در برابر پاتوژن‌ها، تعديل پاسخ‌هاي ايمني، تنظيم ذخيره چربي و تحريك روده نقش موثري دارند. از جمله مهمترين باكتري‌هاي همزيست در دستگاه گوارش از جمله حفره دهاني، باكتري‌هاي اسيد لاكتيك از نوع لاكتوباسيلوس هستند. به منظور جداسازي و بررسي اثرات ضد ميكروبي باكتريوسين توليد شده توسط باكتري‌هاي لاكتوباسيلوس حفره دهاني، تعداد 100 دانش‌آموز دختر و پسر ابتدائي و متوسطه انتخاب و پس از كشت نمونه تهيه شده از حفره دهاني بر روي محيط رشد اختصاصي (MRS)، توسط تكنيك‌هاي مورفولوژيك، بيوشيميائي و مولكولي و تكثير ژن 16SrRNA و توالي‌يابي آن، باكتري‌هاي لاكتوباسيلوس جداسازي و شناسائي شدند. باكتريوسين هر يك از سويه‌ها پس از كشت در محيط كشت جداسازي و مورد تخليص قرار گرفت. به منظور بررسي اثرات ضد ميكروبي باكتريوسين باكتري‌هاي جداسازي شده، از آزمون‌هاي حداقل غلظت بازدارندگي و كشندگي (MIC و MBC) و آزمون انتشار چاهك استفاده گرديد. باكتري‌هاي جداسازي شده باسيلي شكل، گرم مثبت و كاتالاز منفي بودند و الگوي آنتي‌بيوگرام مشابهي با استفاده از آنتي‌بيوتيك‌هاي رايج و تجاري نشان دادند. آزمون‌هاي ضد ميكروبي نشان داد كه اثرات ضد ميكروبي باكتريوسين باكتري‌هاي جداسازي شده بر روي باكتري‌هاي گرم منفي اشرشيا كلي و سودوموناس آئوروژينوزا بيشتر از باكتري گرم مثبت استافيلوكوكوس اورئوس بود. براساس نتايج به دست آمده مي‌توان بيان كرد كه لاكتوباسيلوس‌هاي همزيست در حفره دهاني نقش موثري در جلوگيري از عفونت‌هاي دستگاه گوارش بر عهده دارند.

The human body contains a natural flora of a wide range of symbiotic bacteria that play an important role in the physiology and metabolism of the body and in various biological processes such as digestion and absorption of nutrients, protection against pathogens, modulation of immune responses, regulation of fat storage and intestinal stimulation. Among the most important symbiotic bacteria in the digestive system, including the oral cavity, are lactic acid bacteria of the Lactobacillus type. In order to isolate and investigate the antimicrobial effects of bacteriocin produced by Lactobacillus bacteria in the oral cavity, 100 elementary and secondary school boys and girls were selected and after culturing the sample prepared from the oral cavity on the specific growth medium (MRS), by morphological techniques, biochemical and molecular with 16SrRNA gene amplification and sequencing, Lactobacillus bacteria were isolated and identified. Bacteriocin of each strain was isolated and purified after cultivation in culture medium. In order to investigate the antimicrobial effects of bacteriocin of isolated bacteria, the minimum inhibitory and bactericide concentration (MIC and MBC) tests and the well diffusion test were used. The isolated bacteria were bacilli-shaped, gram-positive and catalase-negative and showed a similar antibiogram pattern with the use of common and commercial antibiotics. Antimicrobial tests showed that the antimicrobial effects of the isolated bacteriocins on the gram-negative bacteria Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa were higher than on the gram-positive bacteria Staphylococcus aureus. Based on the obtained results, it can be stated that the symbiotic Lactobacillus in the oral cavity play an effective role in preventing gastrointestinal infections.