بررسي پايداري نانوسامانه‌ حاوي آنزيم كندروئيتيناز ABCI بر پايه هيدروكسي‌آپاتيت

Stability examination of nanosystem containing chondroitinase ABCI based on hydroxyapatite

در اين مطالعه، آنزيم كندروئيتيناز جداسازي شده از باكتري پروتئوس ولگاريس بر نانوذرات هيدروكسي‌آپاتيت، تثبيت شد. آنزيم دارويي كندروئيتيناز ABCI ماندگاري كمي داشته و محققين براي فائق آمدن به محدوديت استفاده از اين آنزيم، تثبيت آنزيم راپيشنهاد كرده‌اند. هيدروكسي‌آپاتيت يك زيست مواد سراميكي فاقد سميت بوده كه داراي مساحت سطح بالايي مي‌باشد، كه براي بارگذاري مقدار زيادي از آنزيم سودمند است. در اين مطالعه، با هدف دستيابي به بهبود فعاليت دارويي، آنزيم كندروئيتيناز بر نانوذرات هيدروكسي‌آپاتيت، در سه زمان ۴،۱ و ۱۲ ساعت در دماي ۴°C تثبيت گرديد. مشخصه‌يابي آنزيم تثبيت شده با استفاده از روش تصويربرداري به كمك ميكروسكوپ الكتروني روبشي- نشر ميداني و طيف‌سنجي فرابنفش و كندروئيتين ۴-سولفات به عنوان سوبسترا، انجام شد. آنزيم‌هاي تثبيت شده در مدت زمان ۱ و ۴ ساعت فعاليت بهتري نسبت به آنزيم تثبيت شده در مدت زمان ۱۲ ساعت داشتند به طوري كه آنزيم تثبيت شده به مدت ۱۲ ساعت، پس از يك هفته، ٪ ۱۹ فعاليت اوليه‌ي خود را، و آنزيم تثبيت شده به مدت ۱ و ۴ ساعت به ترتيب ٪ ۳۹ و ٪ ۲۸ از فعاليت اوليه‌ي خود را حفظ كردند و اين حالت تا حدود يك ماه باقي ماند.

In this study, chondroitinase ABCI (cABCI), isolated from Proteus vulgaris was immobilized on hydroxyapatite nanoparticles. The maintenance of this enzyme is very limited. To overcome the limitation of using this enzyme, researchers have proposed enzyme immobilization. Hydroxyapatite is a non-toxic ceramic biomaterial that has a high surface area, which is beneficial for loading a large amount of enzyme. In this study, in order to improve the clinical activity, chondroitinase ABCI was immobilized on hydroxyapatite nanoparticles at three times of 1, 4 and 12 hours at 4◦C. Characterization of the immobilized enzymes was carried out using the field emission gun- scanning electron microscopy and UV-spectroscopy and chondroitin 4-sulfate as a substrate. The immobilized enzymes in 1 and 4 hours had better activity than the immobilized enzymes in 12 hours. After one week, the immobilized enzyme for 12 hours, maintained 19% of its initial activity, and the immobilized enzyme for 1 and 4 hours, maintained 39% and 28% of its initial activity, respectively. This state remained for about a month.