شناسايي فاكتورهاي موثر روي پايداري و تكزارپذيزي RAPD و بهينه سازي شرايط واكنش RAPD-PCR در گياه سيب زميني

چكیده: DNA يكي اس پزكاربزدتزيي ضي اّي ا گًطت گًاري ( Random amplified polymorphic DNA) RAPD ر شٍ PCR را تغييز د ذٌّ، ايي ر شٍ سًبت ب تغييزات ضزايط RAPD است. چ ىَ ع اَهل سيادي هي ت اَ ذًٌ الگ يَ با ذًي هطكل هي باضذ،. اها، ض اٌسايي آى فاكت رَ اّ ا وّيت سيادي دارد. RAPD حساس است. تفسيز تغييزات در الگ يَ با ذًي ب ها اجاس هي د ذّ تا بزخي قٍايع ه لَك لَي ك RAPD چ ىَ تجشي تحليل اّي بعذي با ذً اّي ب جَ دَ آهذ در الگ يَ در اًپايذاري ص مًَ قًص داضت را ض اٌسايي ك يٌن. نّ چ يٌي، صى اّيي ك قًص اّي كليذي داضت را كطف وًايين. بزاي ب يْ ساسي ضزايط RAPD ض اٌسايي فاكت رَ اّي ه ثَز ر يٍ تغييزات ،RAPD ب بْ دَ بيطتز كاربزد آسهايطات ضز رٍي هي باضذ. در يك سزي آسهايص اّي هقذهاتي غلظت اّي هختلف تزكيبات هخل طَ RAPD-PCR اٍك صٌ بزرسي ضذ. تًايج طًاى داد، سهايً ك PCR باسد هحص لَ RAPD ر يٍ تكزارپذيزي الگ اَّي با ذًي PCR اٍك صٌ پاييي ب دَ، حتي در دها اّي اتصال پاييي يّچ هحص لَي ت لَيذ طًذ. افشايص غلظت PCR غلظت تزكيبات هخل طَ اٍك صٌ تاثيز RAPD تكزارپذيزي الگ اَّي با ذًي PCR افشايص باسد هحص لَات ،PCR تزكيبات هخل طَ اٍك صٌ در ه فَقيت ب ا ذًاس غلظت تزكيبات هخل طَ PCR سيادي داضت. تًايج بعذي طًاى داد ك دهاي اتصال حجن هخل طَ اٍك صٌ داضت. RAPD تكزارپذيزي الگ اَّي با ذًي PCR افشايص باسد هحص لَات ، PCR اٍك صٌ اثز چطوگيزي در ه فَقيت mM ، 4 پزايوز μM ، 8 ي ىَ ه يٌشين mM ،10X PCR 3/5 اس بافز μ l : در حجن اٍك صٌ 35 هيكز لٍيتز ضاهل پليوزاس در دهاي اتصال 36 درج سا تًي گزاد هحص لَي ت لَيذ طًذ، Taq الگ 3 اٍحذ DNA 120ng ،dNTP 0/44 اها در دهاي اتصال 34 درج سا تًي گزاد تعذاد كوي هحص لَ ت لَيذ ضذ. در دهاي اتصال 32 درج سا تًي گزاد بزاي اكثز الگ ،َ DNA 120ng , 10X PCR 5 اس بافز μ l : 50 ضاهل μl ت لَيذ ضذ. اًْيتا در حجن اٍك صٌ PCR وً اّ هحص لَ پليوزاس در دهاي اتصال 32 درج سا تًي گزاد باسد Taq 3 اٍحذ dNTP 0/44mM ، 4 پزايوز μM ، 8 ي ىَ ه يٌشين mM بزاي بخص اّي هختلف گيا چّ اّي سيب سهي يٌ RAPD افشايص يافت. نّ چ يٌي، الگ اَّي با ذًي PCR اٍك صٌ RAPD آسهايطات RAPD_PCR كطت ضذ در كطت بافت يكساى ب دَ. ب اٌبزايي، با ب يْ ساسي ضزايط اٍك صٌ تكزارپذيز هعتبز هي باض ذٌ. RAPD ، ، ، الگ ، + 2 : كلمات كلیدی