تعيين جنسيت ماهي قزل آلاي رنگين كمان بوسيله توالي يابي منطقه حفاظت شده كروموزوم (sdy) y

نمونه گیری به طور تصادفی از ۲۰ عدد ماهی قزل آلای رنگین كمان از بازار شهرداری رشت و بازار روز تنكابن در فصل زمستان در دی ماه تهیه شدند و هیچ یك از ماهی ها بالغ نبودند و هیچگونه علایم ظاهری كه مبنی بر تشخیص جنسیت باشد را نشان ندادند. قسمتی از باله دمی هر یك از نمونه ها جداگانه درون میكروتیوپ ۱/۵ میلی لیتری حاوی الكل ۹۶ درصد قرار گر فت. برای نگهداری بهتر، نمونه ها تا شروع مرحلهی استخراج در فریزر ۸۰- درجه سانتیگراد قرار گرفتند. استخراج DNA با است. تفاده از كیت (شركت روچ آلمان، كد ۱۱۷۹۶۸۲۸۰۰۱) انجام گردید. به منظور بررسی كمیت و كیفیت DNA استخراج شده از روشهای اسپكتروفتومتری و الكتروفورز ژل آگارز ۱٪ استفاده شد. شرایط چرخه دمایی و مشخصات داده شده به دستگاه تر موسایكلر برای واكنش زنجیرهای پلیمراز به ترتیب مرحله جداسازی ۹۵ - - ۹۴ درجه سانتیگراد به مدت ۳۰ ثانیه، مرحله اتصا ل پرایمرها به هدف در ۵۸ درجه سانتیگراد به مدت ۳۰ ثانیه، مرحله بسط پرایمر ۷۲ درجه سانتیگراد، ۱۰ دقیقه برای ۳۵ چر خه بهینه سازی گردید. محصول PCR بر روی ژل آگارز الكتروفورز شد و سپس از ژلها عكسبرداری شد. ژن تعیین جنسیت S dy كه بروی كروموزوم ۲ واقع شده است نشاندهنده نرینگی در ماهی قزل آلای رنگین كمان دارد. از انجاییكه قزل آلای رز گین كمان از دستگاه تعیین جنسیت (XX/XY) پیروی میكند ۹ نمونه هترو گامتیك (XY) هستند و جنسیت آن ها نر خواهد بود. و بقیه نمونه ها چون این نور فلورسانس را نشان ندادند عدم وجود ژن ۲ SD ر و عدم وجود كروموزوم ۲ را نشان می د هند بنابر این نمونه هایكه تعداد ۱۱ عدد بودند نمونه های همو گامتیكا (XX) جنس ماده خواهند بود. این روش بدون اسیب ر ساندن به ماهی صورت میگیرد ثروشی آسان و سریع خواهد بود و خطای انسانی در این روش به حداقل میرسد . در مورد ماه یان با ارزشی كه نمی خواهیم برای تعیین جنسیت به آن ها اسیبی برسد و یا كشته شوند و همچنین حداقل استرسی به آن ها وارد شود و همچنین ماهیانی با ارزش اقتصادی بالا كه در حال انقراض نیز هستند این روش تعیین جنسیت پیشنهاد می شود.