بررسي ژن هاي b la-IMP-1 و bla-IMP-2 در سويه هاي پسودموناس آئروژينوزا توليد كننده متالوبتالاكتاماز جدا شده از بيماران سوختگي در اصفهان

Detection of bla-IMP-1 and bla-IMP-2 Genes Among Metallo-β-lactamase-Producing Pseudomonas Aeruginosa Isolated from Burn Patients in Isfahan

زمينه و هدف: پسودموناس آئروژينوزا باكتري پاتوژن فرصت طلب ايجاد كننده عفونت به ويژه عامل عفونت در بيماران دچار زخم سوختگي مي باشد. آنتي بيوتيك هاي خانواده كارباپنم به ميزان بالايي در درمان عفونت هاي ناشي از ايزوله هاي پسودموناس آئروژينوزا داراي مقاومت چند گانه به كار مي روند. جداسازي ايزوله هاي توليد كنننده كارباپنماز يكي از نتايج تجويز و مصرف بي رويه كارباپنم ها مي باشد. هدف از اين مطالعه بررسي ژن هايbla-IMP-1 و bla-IMP-2 در سويه هاي پسودموناس آئروژينوزا توليد كننده متالوبتالاكتاماز جدا شده از بيماران سوختگي در اصفهان مي باشد. مواد و روش ها: تعداد 150 ايزوله پسودموناس آئروژينوزا از بيماران مبتلا به زخم سوختگي بستري در بخش سوختگي بيمارستان امام موسي كاظم اصفهان جداسازي گرديد و در مطالعه حاضر وارد شد. باكتري با استفاده از تكنيك هاي بيوشيميايي و ميكروب شناسي شناسايي شد. تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي بر اساس دستورالعمل انستيتو استاندارد آزمايشگاه هاي باليني( (CLSI انجام پذيرفت. آزمون دبل ديسك سينرژي تست جهت تعيين سويه هاي توليد كنننده متالوبتالاكتاماز در ايزوله هاي پسودموناس آئروژينوزا مقاوم به ايميپنم استفاده گرديد. از روش PCR جهت بررسي حضور ژن هاي bla-IMP-1 و bla-IMP-2 در سويه هاي پسودموناس آئروژينوزا توليد كننده متالوبتالاكتاماز استفاده شد و محصولات PCR تعيين توالي گرديد. يافته ها: از 150 ايزوله پسودموناس آئروژينوزا تمامي آنها به عنوان سويه هاي داراي مقاومت چند گانه شناسايي شدند. بيشترين مقاومت در برابر آنتي بيوتيك هاي سيپروفلوكساسين، توبرامايسين، ايميپنم، مروپنم و آميكاسين مشاهده گرديد. تمامي 144 سويه پسودموناس آئروژينوزا مقاوم به ايميپنم به عنوان سويه هاي توليد كنننده متالوبتالاكتاماز شناسايي شدند. از ميان سويه هاي توليد كنننده متالوبتالاكتاماز، ( 19/3%) 29 و (5/3%) 8 سويه به ترتيب حامل ژن هايbla-IMP-1 و bla-IMP-2 تشخيص داده شدند. بحث ونتيجه گيري: براساس نتايج اين تحقيق. مقاومت سطح بالا به ايميپنم همراه با توليد بالاي متالوبتالاكتاماز در ميان سويه هاي پسودموناس آئروژينوزا جدا شده از بيماران دچار عفونت زخم سوختگي در منطقه ما وجود دارد.

Background: Pseudomonas aeruginosa is a nosocomial pathogen which especially causes infections among burn patients. Carbapenems are extensively used for the treatment of infections caused by multidrug-resistant P. aeruginosa isolates. The emergence of carbapenemases producing isolates is an outcome of increased utilization of carbapenems. The aim of this study was to determine the bla-IMP-1 and bla-IMP-2 genes in metallo-β-lactamase (MBL) -producing Pseudomonas aeruginosa isolated from burn patients in Isfahan. Material and Methods: A total of 150 P. aeruginosa were isolated from burn patients hospitalized in Imam-Mousakazem hospital in Isfahan. Antimicrobial susceptibility was determined using disk diffusion method according to the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. Double Disk Synergy Test (DDST) was carried out for screening of MBL production in imipenem-resistant strains. PCR assays were used for detection of bla-IMP-1 and bla-IMP-2 genes among metallo-β-lactamase-producing Pseudomonas aeruginosa isolates. The purified PCR products were sequenced. Results: Of 150 Pseudomonas aeruginosa isolates، %100 identified as multi-drug resistant strains. The most resistance rates were seen against ciprofloxacin، tobromycin، meropenem and imipenem. All of 144 imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates were MBL producing by DDST test. Twenty-nine (19.3%) and 8(5.3%) MBL producing Pseudomonas aeruginosa isolates harbored bla-IMP-1 and bla-IMP-2 genes respectively. Conclusions: According to results of this study high level resistance to imipenem and MBl genes carriage was seen among Pseudomonas aeruginosa isolated from burn patient infections in our region.