مقايسه سويه هاي بومي باسيلوس سوبتيليس و باسيلوس مگاتريوم جداشده از خاك در توليد ويتامين ريبوفلاوين

Comparison of the Native Bacillus subtillis and Bacillus Megaterium Strains Isolated from Soil in Production of Riboflavin

زمينه و هدف: ويتامين B2 (ريبوفلاوين) يك ويتامين زردرنگ و محلول در آب مي باشد. هدف از انجام اين مطالعه شناسايي سويه هاي باسيلوس جداشده از خاك با توانايي در توليد ريبوفلاوين با روش PCR مي باشد. روش بررسي: نمونه برداري از خاك به صورت تصادفي طي 2 روز متمادي در هوايي معتدل صورت گرفت. نمونه برداري از مناطق دور از آفتاب و از عمق 3 تا 10 سانتي متري سطح خاك انجام شد. سپس جنس باسيلوس با استفاده از روش هاي استاندارد تا سطح گونه شناسايي شدند. همچنين ايزوله هاي شناسايي شده با استفاده از روش مولكولي PCR مورد تائيد قرار گرفتند. جهت بررسي توليد ريبوفلاوين از محيط كشت سنتتيك و تكنيك HPLC استفاده گرديد. •نتايج آزمون PCR با استفاده از ژن 16SrRNA نشان داد كه از مجموع 32 سويه به دست آمده تعداد 10 سويه باسيلوس سوبتيليس و 2 سويه باسيلوس مگاتريوم بودند. اين سويه هاي جداسازي شده به همراه سويه استاندارد باسيلوس مگاتريوم PTCC 1250 ازنظر توليد ريبوفلاوين در محيط كشت سنتتيك و HPLC مثبت بودند. •در ميان باكتري هاي ساكن خاك باسيلوس سوبتيليس بيشترين نقش را در ميزان توليد ريبوفلاوين داشته و به منظور تائيد سويه هاي توليدكننده ريبوفلاوين استفاده از روش مولكولي ضروري به نظر مي رسد.

Background and Objectives: Vitamin B2 (riboflavin) is a water-soluble vitamin and yellow. The aim of this study is to identify strains of Bacillus isolated from soil do with the ability to produce riboflavin by PCR. Materials and Methods: Soil samples was mild randomly during 2 consecutive days the air. Sampling was performed of areas far from the sun and from 3 to 10 cm soil depth. The genus Bacillus were identified to species level using standard methods. Also isolates were approved identified using the PCR method. To study the riboflavin production of synthetic culture media were used and HPLC techniques. Result: PCR using gene 16SrRNA test results showed that 32 strains obtained from a strain of Bacillus subtilis and 10 were 2 strain of Bacillus megaterium. The isolated strains of Bacillus megaterium PTCC 1250 with standard strains were positive of riboflavin production in synthetic medium and HPLC. Conclusions: Bacillus subtilis bacteria living in the soil among the most important role in the production of riboflavin and riboflavin-producing strains to confirm the use of molecular methods is necessary.