بررسي ايمني زايي ژن 39P بروسلا آبورتوس در موش بالب سي

Evaluation of the immunogenicity of Brucella abortus P39 gene in Balb/c mice

زمينه و هدف: بروسلا باكتريهاي گرم منفي داخل سلولي ميباشند. با توجه به معضلات بهداشتي، اقتصادي و اجتماعي بروسلوز، كنترل اين بيماري از اهميت خاصي برخوردار است. واكسيناسيون رايج شامل استفاده از سويههاي زنده و ضعيف شده اين باكتريها است. در اين تحقيق سعي بر آن است تا ايمني زايي ژن 39P بروسلا آبورتوس در موش بالب سي بررسي شود. مواد و روشها: اين مطالعه يك بررسي تجربي مي باشد كه ابتدا با استفاده از PCR ژن 39P تكثيرگرديد و سپس در ناقل يوكاريوتيكي 3pcDNA كلون شد. پلاسميد به دست آمده در سه مرحله به موشهاي بالب سي به صورت عضلاني تزريق گرديد. پس از آخرين واكسيناسيون آزمونهاي ايمنولوژيك از جمله پاسخ تكثيري لنفوسيتي، سنجش انترفرون گاما وانترلوكين 5 و تعيين عيار a2IgG و 1IgG انجام شد. يافتهها: ميزان ضريب تحريكي در پاسخ تكثيري لنفوسيتي برابر 6/3، انتر فرون گاما اندازهگيري شده برابر 3 نانوگرم بر ميلي ليتر و انتر لوكين 5 به مقدار ناچيزي بود. تيتر a2IgG برابر 640/1 و تيتر IgG1 40/1 به دست آمد. نتيجه گيري: نتايج مربوط به آزمونهاي ايمنولوژيك نشان دهنده تحريك مناسب سيستم ايمني موش پس از تزريق پلاسميد حاوي ژن 39P است. تحريك سيستم ايمني از نوع 1Th بوده كه تعداد باكتريهاي طحال را نيز كاهش داده است. بنابراين پروتيين 39P نقش ايمني زايي نسبتاً خوبي را دارد. استفاده از روش DNA Vaccine در تحريك ايمني سلولي عليه اين باكتري قابل توجه است.

Background: Brucella is a gram-negative intracellular bacterium. Since Brucella brings about health and socio-economic problems, its control is of primary importance. The common method of vaccination includes using live attenuated strains of this bacterium. This study was done to evaluate the immunogenicity of Brucella aburtus P39 gene in Balb/c mice. Materials and Methods: In this experimental study, P39 gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR) method and after extraction, it was sub-cloned to eukaryotic expression vector pcDNA3. The intramuscular injection of the obtained plasmid to the Balb/c mice was done in three stages. After the last vaccination, immunologic tests, such as proliferative response in lymphocytes, IFN- assessment, IL-5, and determination of IgG2a and IgG1, were run. Results: The level of activation in splenic lymphocytes response was 3.6 and the measured IFN- was 3 ng/ml, whereas IL-5 was insignificant. IgG2a and IgG1 titers were 1.640 and 1.40, respectively. Conclusion: The findings of the immunological analysis show the appropriate immune response in Balb/c mice model after the injection of P39 gene containing plasmid. The immune system response was in Th1 form which decreased the number of bacteria in spleen. Therefore, P39 gene is of appropriate immunogenicity and DNA vaccination is efficient in the activation of cell immune response against this bacterium.