بررسي اثر مدت زمان انكوباسيون و تيمار ويتامين E بر تحرك ، حيات و فراگمنتاسيون DNA اسپرم نمونه هاي آستنوتراتوزواسپرمي

Effect of Incubation Time and Vitamin E Supplementation on Sperm Motility, Viability and DNA Fragmentation in Asthenoteratozoospermic Samples

زمينه و هدف: تحرك پايين، آسيب DNA و استرس اكسيداتيو بالا در اسپرم مردان آستنوتراتوزواسپرمي موجب بازده ضعيف درمان‌هاي كمك باروري (ART) در اين بيماران مي‌گردد. هدف از اين مطالعه تعيين اثر ويتامين E، به عنوان يك آنتي‌اكسيدان قوي، بر تحرك، حيات و آسيب DNA اسپرم در زمان‌هاي مختلف انكوباسيون (پس از 2، 4 و 6 ساعت) به منظور بهبود خصوصيات اسپرم افراد آستنوتراتوزواسپرمي جهت ART بود. مواد و روش‌ها: نمونه مني 50 بيمار آستنوتراتوزواسپرمي جمع‌آوري و سپس ارزيابي شد. هر نمونه به دو گروه كنترل و تيمار ويتامين E (2mM) تقسيم‌بندي و سپس در دماي 37 درجه سانتي‌گراد و CO2 با غلظت 6% به مدت 2، 4 و 6 ساعت نگهداري شد. پس از انكوباسيون، پارامترهاي تحرك، حيات و فراگمنتاسيون DNA اسپرم در هر گروه ارزيابي گرديد. داده‌ها از طريق روش آماري اندازه‌گيري تكراري ANOVA (Repeated measure) و آزمون T-test آناليز و تفاوت ميانگين‌‌ها در سطح P<0.05 معني‌دار در نظر گرفته شد. يافته‌ها: كاهش معني‌داري در ميزان قابليت تحرك و حيات اسپرم و نيز افزايش معني‌داري در ميزان آسيب DNA اسپرم (پس از 6 ساعت انكوباسيون) در گروه كنترل نسبت به پيش از انكوباسيون مشاهده شد (P<0.05). ميزان تحرك و حيات در گروه ويتامين E در مقايسه با گروه كنترل غير تيماري به طور معني‌داري افزايش داشت (P<0.05). آسيب DNA اسپرم نيز پس از 6 ساعت تيمار با ويتامين كاهش معني‌داري (p<0.05) نشان داد. نتيجه‌گيري: تيمار in vitro نمونه‌هاي سمن بيماران آستنوتراتوزواسپرمي با ويتامين E موجب حفاظت اسپرماتوزوآ در برابر اثرات مخرب ROS از طريق حفظ شرايط آنتي اكسيداني مي‌گردد.

Background: In Asthenoteratozoospermic men, low motility, defected DNA and highly oxidative stress in sperm cause poor assisted reproductive techniques (ART) outcomes. The aim of this study was to determine the effect of Vitamin E (Vit E), as a potent antioxidant, on sperm motility, viability and DNA integrity at different times of in vitro incubation (after 2, 4 and 6-h) to improve asthenoteratozoospermic semen samples for ART. Materials and Methods: Asthenoteratozoospermic semen samples of 50 volunteers were collected and examined. Each sample was divided into two groups of control and vitamin E (2mM) and kept in the 37 °C and 6 % CO2 for 2, 4 and 6 hours. After this incubation, sperm motility, viability and sperm DNA fragmentation (SCD) were evaluated in each group. Data were analyzed using repeated measurement of ANOVA and T-test. The means were considered significantly different at p<0.05. Results:Significant decrease in total and progressive motility and viability as well as significant increase in sperm DNA damage (after 6h of incubation) were found in control group vs. the control group before incubation (p<0.05). The sperm motility and viability was significantly higher in vitamin E group compared to untreated control group (p<0.05). Our results also showed that DNA fragmentation significantly was lower after 6h of vitamin E treatment (p<0.05). Conclusion: In vitro supplementation of vitamin E in asthenoteratozoospermia semen samples may protect spermatozoa from maltreatment effect of ROS during sperm sampling via keeping enzymatic and antioxidant process in optimum condition.