نقش تنظيمي IL-24/mda-7 درون‌زاد بر پاسخ التهابي سلول‌هاي ستاره‌اي كبدي HSC)، LX-2)

The Modulatory Role of Endogenous IL-24/mda-7 in Inflammatory Response of Human Hepatic Stellate Cell (HSC), LX2

زمينه و هدف: ميزان بالاي بيماري فيبروز كبدي و درمان‌هاي محدود آن عامل مهمي براي فهم بهتر مكانيسم‌هاي مولكولي اين بيماري مي‌باشد. پيشرفت در درك جنبه‌هاي مولكولي سلول ستاره‌اي كبدي (HSC) يك زمينه‌ي اختصاصي در درمان فيبروز كبدي فراهم مي‌كند. ژن IL-24 (IL-24/mda-7) اولين بار به عنوان يك ژن تمايز دهنده انتهايي در سلول‌هاي ملونوما مطرح شد، اما پاسخ التهابي سلول‌ها به اين ژن به طور كامل روشن نشده است. مواد و روش‌ها: سلول LX-2 (سلول ستاره‌اي كبد انسان، HSC) با لپتين (كنترل مثبت) و محيط خالي (كنترل منفي) مواجه شدند. هم­چنين اين سلول ها با پلاسميد خالي (pcDNA 3.1) و وكتور حاوي ژن IL-24/mda-7 (pcDNA 3.1/mda-7) ترانسفكت شدند. ميزان التهاب اين سلول­ها با بررسي بيان ژن IL-1β، با كمك روش Real-time RT-PCR ارزيابي شد. هم­چنين، نقش تنظيمي IL-24/mda-7 بر روي التهاب با بررسي بيان ژن هاي SOCS1 و SOCS3 مشخص شد. يافته­ها: سطح بيان IL-1β، SOCS1 و SOCS3 در گروه­هاي سلولي اندازه‌گيري و مقايسه شد. هر چند سلول‌هاي ترانسفكت شده با پلاسيمد بياني ميزان بالاتري از IL-1β را نشان دادند، اما اين تفاوت نسبت به گروه كنترل معنادار نبود. نتايج نشان داد كه بيان SOCS1 و SOCS3 در گروه سلولي كه با pcDNA3.1/mda-7 ترانسفكت شده اند، نسبت به گروه كنترل افزايش معناداري دارد (0428/0 = p ، 0179/0 = p). نتيجه­گيري: بيان درونزاد IL-24/mda-7 به‌طور معناداري باعث تنظيم مسير التهابي در سلول‌هاي ستاره اي كبدي مي‌گردد. بنابراين IL-24/mda-7 و مسيرهاي سيگنالينگ مربوطه مي‌توانند به عنوان يك هدف در درمان فيبروز مورد توجه قرار گيرند.

Background: High morbidity and limited therapies of hepatic fibro genesis are important factor for better understanding the molecular mechanisms of the disease. Advances in the understanding of the molecular behavior of hepatic stellate cells (HSC) allow the progress of a field dedicated to anti-fibrotic therapy. Melanoma differentiation associated gene-7 (IL-24/mda-7) as a gene induced during terminal differentiation in human melanoma cells, but the inflammatory response of cells to IL-24/mda-7 is not entirely cleared. Materias and Methods: LX-2 cells (a human hepatic stellate cell) were treated by leptin (positive control), media (control negative), or were transfected by empty plasmid and pcDNA3.1/mda-7. The inflammatory state was evaluated through measuring the mRNA expression level of inflammatory molecule, IL-1β. The role of IL-24/mda-7 modulation on inflammatory response was assayed using SOCS1 and SOCS3 gene expressions. Results: The expression levels of IL-1β, SOCS1 and SOCS3 were compared in LX-2 cell line groups. The expression of the IL-1β in the transfected cells was higher than the control cell, but it was not significant. The results indicated that the expressions of SOCS1 and SOCS3 were up-regulated following pcDNA 3.1/mda-7 transfection into LX-2 cells compared to control plasmids (p=0.0179, p=0.0428). Conclusion: The endogenous IL-24/mda-7 exhibited a significant modulatory effect on stellate cells. Therefore, IL-24/mda-7 and relevant signaling pathways could be employed as a target for fibrosis treatment.