تأثير ضد بيوفيلمي تركيب دارويي فلوكونازول/تربينافين در بيان ژنHWP1 كانديدا آلبيكانس

Antibiofilm Activity of Fluconazole/Terbinafine Combination in Candida albicans HWP1 Gene Expression

زمينه و هدف: يكي از عوامل بيماري­زاي ضروري كانديدا آلبيكانس تشكيل بيوفيلم مي­باشد. علاوه بر اين، تعداد عوامل ضد قارچي براي درمان كانديديازيس محدود است. افزايش ميزان مقاومت دارويي باعث شده است كه استفاده از تركيب عوامل ضد قارچي مورد توجه بيشتري قرار گيرد. هدف از مطالعه حاضر، ارزيابي تأثير ضد قارچي فلوكونازول و تربينافين به تنهايي و تركيب فلوكونازول/ تربينافين در مهار تشكيل بيوفيلم كانديدا آلبيكانس بوده است. مواد و روش­ ها: در اين مطالعه مقطعي، 10 جدايه كانديدا آلبيكانس از بيماران دچار ضعف سيستم ايمني جدا و شناسايي گرديد. آزمون حساسيت سنجي ضد قارچي با استفاده از روش ميكرودايلوشن موسسه استاندارد آزمايشگاهي و باليني تعيين شد. سنجش رنگ سنجي كريستال ويولت، مشاهده ميكروسكوپي و ارزيابي ميزان بيان ژنHWP1 در غلظت­هاي مختلف بر اساس MIC با هدف بررسي تأثير ممانعت از تشكيل بيوفيلم كانديدا آلبيكانس تحت تيمار با عوامل ضد قارچي فلوكونازول و تربينافين به تنهايي و تركيب فلوكونازول/ تربينافين انجام شده است. يافته­ ها: نتايج بيان­ گر تأثير هم افزايي در تركيب فلوكونازول/ تربينافين با طيف شاخص غلظت مهاري نسبي 375/0-5/1 بود. تركيب فلوكونازول/ تربينافين موجب كاهش سلول هاي مخمري و ممانعت از تشكيل بيوفيلم شد. در نهايت، بيان ژنHWP1 به طور معناداري كاهش پيدا كرد (05/0 > p). نتيجه­ گيري: نتايج حاصل از آزمايش نشان داد كه فلوكونازول/ تربينافين مي­ تواند براي درمان عفونت­هاي كانديديازيس موثرتر باشد. هم­چنين، ژنHWP1 را مي­توان به عنوان ژن هدف در تعامل هم افزايي فلوكونازول/ تربينافين عليه بيوفيلم كانديدا آلبيكانس معرفي نمود.

Background: Biofilm formation represents one of the major virulence factors of Candida albican. However, the number of antifungal drugs is limited for the treatment of candidiasis. Combination therapy is one of the most frequently used techniques to alleviate this problem. In this study, we aimed to evaluate the antifungal activity of fluconazole and terbinafine alone and in combination on C. albicans biofilm inhibition. Materials and Methods: In this cross- sectional study, 10 clinical isolates of C. albicans were identified from the immunocompromised patients. Antifungal susceptibilities were performed using the CLSI standard reference method. The crystal violet colorimetric method, direct microscopic observation and expression of HWP1 gene at different concentrations based on MICs were carried out to investigate inhibition of biofilm formation in C. albicans treated alone and in combination with fluconazole and terbinafine. Results: The data indicated that combination of fluconazole with terbinafine exerted synergistic effects with fractional inhibitory concentration index ranged from 0.375 to 1.5. The combination of fluconazole with terbinafine reduced the number of yeast form and inhibited the biofilm formation. Finally, the expression level of HWP1 was down regulated (p< 0.05). Conclusion: These results suggest the possibility of fluconazole/ terbinafine to treat candidiasis with a higher efficiency. In addition, HWP1 gene could be probable target in synergistic interaction of fluconazole/ terbinafine against C. albicans biofilm.