جداسازي باكتري‌هاي ليپوليتيك از منابع محيطي به منظور تجزيّه‌ي پلي سوربات‌ها در پساب‌هاي صنعتي

Isolation of Lipolytic Bacteria from Environmental Resources for Biodegradation Polysorbates in Industrial Wastewater

زمينه و هدف: امروزه يكي از دغدغه ­هاي زيست محيطي، ورود پساب­ هاي آلوده به ويژه صنايع شوينده و پاك­كننده‌ي حاوي دترجنت‌ها وسورفكتانت‌ها ازجمله پلي­سوربات­ها­ به آب­هاي سطحي و زير زميني مي باشد. با توجّه به تماس انسان و ساير موجودات زنده با اين مواد، زدايش و تجزيه آن‌ها اهميّت فراواني دارد. درپژوهش حاضر، تجزيه‌ي يك دترجنت غيريوني گروه پلي‌سوربات به نام تويين 80 توسّط باكتري‌هاي ليپوليتيك جدا شده از پساب و لجن فعّال پالايشگاه نفت تهران و تأثيردوعامل pH ودما بر روند تجزيه‌ي اين دترجنت مورد بررسي قرار گرفته است. مواد و روشها: در جداسازي اوّليّه‌ي آن‌ها از محيط كشت تريپتون سوي آگار (TSA) حاوي تويين80 وروغن زيتون با غلظت هاي متفاوت به‌طورجداگانه استفاده شد. سپس دو محيط كشت اختصاصي تريبوتيرين آگار و تويين آگار به ترتيب جهت بررسي توليد آنزيم ليپازوتجزيّه‌ي تويين 80 مورداستفاده قرارگرفت. همچنين جهت تأييد تجزيه تركيب مورد نظر از دو روش دستگاهي اسپكتروفتومتري وطيف سنجي مادون قرمز (FTIR) استفاده گرديد. يافته­ ها: نتايج حاصل نشان مي‌دهد، باكتري‌هاي جدا شده با توليد آنزيم ليپاز قادر به تجزيه‌ي پلي‌سوربات 80 بوده وبهترين تجزيه كنندگان به ترتيبب باسيلوس سويه 1sp، سودوموناس آئروجينوزا و باسيلوس سويه 2 spمي باشند.سويه 1sp پس از شناسايي مولكولي براساس تعيين توالي ژن SrRNA16، به عنوان Bacillus cereus ATCC14579 شناخته شد. نتايج بررسي تأثيردوعامل pH ودما برتسريع روند تجزيه تويين 80، سويه سودوموناس را گزينه مناسب تجزيه درpH اسيدي ودوباسيل گرم مثبت را گزينه مناسب تجزيه در pH قليايي معرفي مي نمايد. سه باكتري مذكور در دماي ْ37 بهترين تجزيه رانشان دادند. نتيجه ­گيري: درپژوهش حاضر باكتري‌هاي ليپوليتيك جداشده از منابع محيطي، قادر به تجزيّه‌ي‌ دترجنت غيريوني تويين 80 از گروه پلي‌سوربات بودند. از بين باكتري‌هاي جدا شده، بهترين تجزيّه‌ي توسّط باسيلوس سرئوس مشاهده شد.

Background & Objectives: Today, entrance of wastewaters, especially detergent and cleaner agent’s production industries wastewaters, to surface and underground waters is one of environmental pollution concerns. These wastewaters are containing detergents and surfactants, such as polysorbates and, because of exposure of human and other organisms, their degradation is of great important. This research analyses degradation of a non-ionic detergent in polysorbate group called Tween 80 (polysorbate 80) and studies effect of pH and temperature on degradation rate of this detergent, using lipolytic bacteria (isolated from Tehran oil refinery wastewater and activated sludge). Materials & Methods: For primary isolating of lipolytic bacteria, the TSA medium containing Tween 80 and olive oil has been, separatively, used. Then specific culture Tween agar and Tributyrin agar have been used to study for lipase enzyme bacteria production. Also for confirmation degradation, instrumental methods, spectrophotometer and FTIR were used. Results: The results shows that the isolated bacteria are able to depredate polysorbate 80 by lipase enzyme production. Bacillus cereus was known as the best degradator after the identification of the molecular basis of sequencing 16S rRNA. Bacillus cereus ATCC 14579 (T), Pseudomonas aeruginosa and other Bacillus sp was known. Conclusion: The results showed that pH and temperature affects on the degradation of tween, and the Pseudomonas aeruginosa at acidic range of pH, two gram positive bacillus at alkali range of pH and three bacteria at 37 ˚C have the best degradation.