بررسي اثر ضد سرطاني عصاره‌‌‌هاي آبي و هيدروالكلي برگ گياه بومي دارمازو (Quercus infectoria) عليه رده سلولي سرطان كولون (HT29)

Evaluation of Anticancer Effect of Aqueous and Hydroalcoholic Extracts of Quercusin Fectoria Leaf against Colon Cancer HT29 Cell Line

زمينه و هدف: گياه دارمازو(Quercus infectoria) در طب سنتي و مطالعات گذشته به عنوان درمان براي سرطان پيشنهاد شده است. هدف از پژوهش حاضر، بررسي اثر سميت عصاره­هاي آبي و هيدروالكلي برگ گياه دارمازو عليه رده سلولي سرطاني كولون HT29 و ارزيابي تغيير بيان دو ژن Bax و Bcl-2 در سلول­هاي تيمار شده مي­باشد. مواد و روش­ها: در اين مطالعه، عصاره آبي و هيدروالكلي برگ گياه دارمازو تهيه گرديد. سپس، رده‌هاي سلولي سرطاني HT29 و نرمال HEK293 توسط غلظت­هاي مختلف عصاره­ها به مدت 24 ساعت تيمار شد و اثرات سميت دو عصاره توسط روش رنگ‌سنجيMTT ارزيابي گرديد. در نهايت، ميزان بيان ژن پروآپوپتوزي Bax و ژن ضدآپوپتوزي Bcl-2 در سلول­هاي تيمار شده نسبت به ژن مرجعGAPDH توسط روش Real-Time PCR مورد بررسي قرار گرفت. يافته­ها: با توجه به نتايج تست MTT مشخص شد كه فقط عصاره آبي داراي اثر توكسيسيتي وابسته به دوز عليه دو رده سلولي مي‌باشد. از اين­رو، بيان ژن‌‌‌هاي Bax و Bcl-2 در سلول­هاي تيمار شده با عصاره آبي به ترتيب به ميزان 8/2 (05/0p˂) و 2/2 (05/0p˃) برابر نسبت به ژن مرجع تغيير يافت.نتيجه­ گيري: با توجه به نتايج ‌‌‌مي‌توان گفت كه عصاره آبي برگ گياه دارمازو داراي قابليت القاي آپوپتوز در سلول­هاي سرطاني كولون HT29 مي‌باشد و با مطالعات بيشتر مي‌توان آن را در درمان سرطان كولون به كار گرفت.

Background and Aim: In traditional medicine and previous studies, Quercus infectoria plants have been suggested as a cancer treatment. The aim of the current study was to investigate the cytotoxic effect of aqueous and hydro alcoholic extracts of Quercus infectoria leaf against colon cancer HT29 cell line and to evaluate the Bax and Bcl-2 gene expression in treated cells. Materials and Methods: In this study, aqueoFus and hydro alcoholic extracts of Quercus infectoria leaf were prepared. Then, the HT29 and HEK293 cell lines were treated by various concentrations of extracts for 24 hours and the cytotoxicity effect of extracts was estimated by colorimetric MTT (methyl thiazolyl tetrazolium) assay. Finally, the pro-apoptotic Bax and anti-apoptotic Bcl-2 gene expression in treated cells compared to GAPDH reference gene expression was evaluated using real time PCR technique. Findings: According to the MTT results, the cytotoxic activity of aqueous extract has dose-dependent manner against both cell lines, therefore, the Bax and Bcl-2 gene expression levels in treated cells by aqueous extract were changed 2.8 (p˂0.05) and 2.2-fold (p˃0.05) compared to reference gene, respectively. Conclusion: According to the results, it seems that the aqueous extract of Quercus infectoria leaf has the potential for apoptosis induction in colon cancer HT29 cell line and based on more studies, it can be used as a colon cancer treatment.