ارزيابي بيان ژن ساكس 2 با تكنيك RT-PCR در بافت سرطاني پستان موش بالب سي (خالص) تيمار شده با فيكوسيانين سيانوباكتري (Anabaenasp. ISC 55)

Assessmentsox-2 Expression by RT-PCR in the Evaluation of Femal Balb/C Mouse with Breast Cancer Tissue Treated with Phycocyanin (Anabaena Sp.ISC55) Cyanobacteria

زمينه و هدف: امروزه يكي از روش هاي مفيد در بررسي بيماري شايع سرطان پستان، مطالعات سلولي و مولكولي است. ژن ساكس 2 در فعال كردن ﺳﻠﻮﻝ ﻫﺎﻯ ﺑﻨﻴﺎﺩﻯ ﻭ ژﻥ ﻫﺎﻯ ﺷﺮﻭﻉ ﻛﻨﻨﺪﻩ ﺗﻤﺎﻳﺰ نقش مهمي را ايفا مي كند، در حالي كه افزايش ﺑﻴﺎﻥ اين ژن در بافت هاي سرطاني پستان نيز مشاهده شده است. هدف از اين پژوهش بررسي ميزان بيان ژن ساكس 2 در بافت هاي سرطاني موش­ هاي تيمار شده با فيكوسيانين سيانوباكتري Anabaenasp. ISC 55 است. روش كار: براي انجام اين تحقيق، 50 سر موش ماده با نژاد بالب سي (خالص) تهيه و از روش كشت تومور سرطاني در ناحيه ي پستاني، جهت القا سرطان پستان استفاده گرديد. از طرفي پس از كشت سويه سيانوباكتري در محيط كشت BG11، استخراج فيكوسيانين با روش هاي اختصاصي صورت گرفت و سپس با نتايج به دست آمده از اسپكتروفتومتري (UV-VIS)، دوزهاي 10 و 150 ميكروليتري جهت تيمار گروه هاي درماني در نظر گرفته شد. پس از اتمام دوره 21 روزه تزريق، از بافت ها استخراج RNA و متعاقباً ساخت c DNA صورت گرفت و در حضور پرايمر هاي اختصاصي و شاهد (ژن بتا اكتين)، روش RT-PCR و الكتروفورز انجام و نتايج با نرم افزارهاي SPSS-16 و Image j مورد آناليز قرار گرفتند. يافته­ ها: نتايج حاصل از RT-PCR در بررسي هاي سلولي و مولكولي، نشان دهنده ي اين بود كه فيكوسيانين با دوز 150 ميكروليتر تاثير مهاركنندگي بر ميزان بيان ژن ساكس 2 در سلول هاي سرطاني پستاندار دارد. نتيجه گيري: با توجه به نتايج، فيكوسيانين آنابنا داراي خواص ضد توموري، از طريق كاهش بيان ژن ساكس 2 در بافت درگير با سرطان پستان مي باشد.

Inroduction & Objective: One of the useful common methods in the study of breast cancer is cellular and molecular studies. Sox-2 play an important role in the differentiation of stem cells and started gene, but the expression of this gene in breast cancer tissue are observed. Therefore, the study of gene expression in cancer tissues of mice treated with phycocyanin from Anabaena sp. ISC55 cyanobacteria, which has anti- tumor and anti oxidant effect is there.Material and Methods:In this laboratory study 50 female Balb/C mice (In bread) prepared and planting methods in the area of breast tumors, was used to induce breast cancer. After from cultivation cyanobacteria in the culture medium BG11, extraction phycocyanin to face proprietary were done and some then with the results from spectrophotometry(UV-VIS), doses of 10 and 150 μl order to treatments groups therapeutic were considered. After from completion periods of 21 days injection, RNA extraction would from tissue and subsequently making cDNA were done and then with the primer by proprietary and witness(Bactin), RT-PCR and electrophoresis was performed, and results were analyzed by softwares SPSS-16 and Image j.Results: Analysis of the results of RT-PCR technique showed that a dose of 150 ml phycocyanin inhibitory effect on Sox-2 expression in breast cancer cells.Conclusion: The findings of the present study indicated that phycocyanin from Anabaena sp.ISC55 cyanobacteria has some antitumor effects and can be used in the treatment of breast cancer.