بررسي اثر لوواستاتين بر بيان ژن كد كننده پروتئين Ran در قارچ بيماري زاي ترايكوفايتون روبروم (Trichophyton rubrum)

Investigation the effect of Lovastatin on experession of Ran protein gene in dermatophyte pathogen Trichophyton rubrum

ترايكوفايتون روبروم مهم ‌ترين عامل درماتوفيتوزيس بافت پوست و ناخن در سراسر دنيا مي‌ باشد. مطالعات زيادي روي اين قارچ انجام گرفته است و خصوصيات متعددي از اين قارچ در زمينه بيولوژي مولكولي بررسي شده است. ليكن هيچ اطلاعاتي در مورد عملكرد پروتئين Ran در اين درماتوفيت در دسترس نمي‌ باشد. در اين بررسي اثر غلظت‌هاي متوالي لوواستاتين بر رشد قارچ ترايكوفايتون روبروم ارزيابي شد. هم‌ چنين اسيد نوكلئيك RNA قارچ رشد يافته در حضور لوواستاتين با روش استاندارد از توده ميسليومي استخراج شد. پرايمرها بر مبناي بررسي توالي‌ هاي يكسان ژن كدكنندۀ Ranسلول‌ هاي ساير يوكاريوت‌ ها طراحي گرديده و سنتز شدند. با استفاده از پرايمرهاي سنتز شده و با ساخت cDNA از RNA استخراج شده از قارچ ترايكوفايتون روبروم و براساس پروتوكل PCR، ژن Ranتكثير شد. اثر لوواستاتين بر روي رشد قارچ مورد بررسي قرار گرفت و مشخص شد كه رشد قارچ ترايكوفايتون روبروم تحت تأثير اين دارو كاهش مي‌ يابد و حداقل غلظت بازدارنده رشد 15ميكروگرم بر ميلي‌ ليترتعيين شد. مقايسه بيان ژن مذكور در قارچ‌ هاي رشد يافته در غلظت‌ هاي مختلف لوواستاتين نشان داد كه بيان اين ژن در حضور دارو كاهش يافته و با افزايش غلظتدارو ميزان بازدارندگي افزايش مي ‌يابد.

Trichophyton rubrum is the most common cause agents of dermatophytosis in human skin and nail tissue. Some properties of T. rubrum have been investigated in molecular level; however no information is available regarding the Ran protein in this dermatophyte. The effects of lovastatin were investigated by using various concentrations of this medicine in T. rubrum cultures. Nucleic acids (RNA) were isolated from obtained mycelial mass of this fungus by standard methods. Pairs of primers were designed and synthesis from highly conserved regions of the Ran protein genes in other eukaryotic cells. Then primer and cDNA which synthesis of RNA extracted of T. rubrum utilized in PCR. The growth of fungi was decreases in this medium. Lovastatin depend on concentration reduced growth of fungi and gene expression of Ran protein gene, and with increase of drug concentration growth and gene expression were decreased.