بررسي بر هم كنش عصاره الكلي بره موم، لواميزول، بتاگلوكان و لاكتوفرين با رده سلولي CHSE-214 در شرايط آزمايشگاهي

A survey on the effects of ethanol extract of propolis, β-glucan and levamisole on CHSE-214 Cell line

در حال حاضر استفاده از محرك­ هاي رشد و ايمني به­ طور گسترده­ اي در پرورش آبزيان مورد استفاده قرار مي­ گيرد. اين تركيبات داراي خواص مفيدي هستند ولي تاكنون تحقيقي پيرامون اثرات ناخواسته آن­ ها در آبزيان انجام نشده است. رده سلولي CHSE-214 عموماًً در بررسي اثرات تركيبات مختلف هم­ چون محرك­ هاي رشد و ايمني در آبزيان، تكثير ويروس ­ها در دماهاي خاص و آشكار كردن پديده­ آپوپتوزيس در سلول­ هاي مختلف، به­ واسطه­ دارا بودن برخي ويژگي­ هاي اختصاصي، كاربرد دارد. بر اين اساس هدف از بررسي حاضر تاثير غلظت ­هاي مختلف محرك­ هايي نظير عصاره الكلي بره موم، لواميزول، بتا گلوكان و لاكتوفرين بر رده سلولي CHSE-214 در شرايط آزمايشگاهي است. به ­همين خاطر، براي اين كار سلول­ هاي فوق از انستيتو پاستور ايران تهيه و در محيط كشت سلولي RPMI و در حضور سرم جنين گاوي و آنتي بيوتيك ­هاي پني­سيلين و استرپتومايسين در شرايط دمايي 37 درجه سانتي­ گراد و اتمسفر 5 درصدي گاز CO2 كشت داده شدند. در اين بررسي اثرات تركيبات فوق در غلظت­ هاي مختلف (بر حسب ميكروگرم در ليتر) و زمان­ هاي مختلف (بر حسب ساعت) با روش رنگ ­سنجي MTT سنجيده شد. در نهايت تجزيه و تحليل آماري داده­ ها با روش آناليز واريانس يك ­طرفه و آزمون توكي (Tukey''s test) انجام گرفت. يافته­ هاي حاضر ثابت كرد كه اثرات سلول­ كشي تركيبات فوق به­ طور معني ­داري (0/05>P) وابسته به غلظت و مدت زمان است. از طرفي هر تركيب بسته به غلظت مي­ تواند به­ طور معني­ داري (0/05>P) سبب القاء مرگ در رده سلولي CHSE-214 گردد و اين خاصيت در بين تركيبات متفاوت است. نتايج بررسي حاضر نشان داد كه سه تركيب بتاگلوكان، لواميزول و لاكتوفرين به نسبت به ­طور معني­ داري (0/05>P) داراي حداقل خاصيت سلول­ كشي هستند، درحالي كه عصاره الكلي بره موم مي­ تواند در غلظت ­هاي بالا به ­طور معني­ داري (0/05>P) كشنده باشد.

Currently the growth and immune stimulants commonly were used in aquaculture. These compounds have beneficial effect but there is not any study on their side effects in fish. So، the goal of this study was to evaluate in vitro effects of ethanol extract of propolis، β-glucan and levamisole on CHSE-214 Cell line. The live cells of CHSE cell line was prepared from Pasture institute and cultured in RPMI supplemented with bovine fetal serum، penicillin and streptomycin at 37 °C and 5% of CO2. Propolis samples were collected from West Azarbaijan honey bee، Apis mellifera carnica، and alcoholic extract was prepared. In this study different concentrations of these compounds (500، 1000، 2000 and 4000 µg/ml) at 24، 48 and 72 hours were assay with MTT as a colorimetric method. Finally، statistic analysis of data was done with one way analysis of variance and Tukey’s. Results showed that significantly ethanol extract of propolis has cytotoxicity properties at all different concentrations (P<0.05); the lower effect was record at 500 µg/ml (8.01± 1.01 percent) after 24 h and highest cytotoxicity effect was seen at 4000 µg/ml (100%) at 72 h. Also results showed that levamisole significantly (P<0.05) has cytotoxicity property on CHSE-214 cell line. Levamisole at 500 µg/ml concentrations has not inhibitory effect on CHSE-214 after 24 h، but the higher cytotoxicity was seen at 4000 µg/ml (20.11±1 percent) after 72 h. Beta glucan has not cytotoxicity effects on CHSE cell line at 500 µg/ml in all of time periods، the higher cytotoxicity effects was seen at 4000 µg/ml (5.06 ± 1.6 percentage) after 72 h. It should be concluded that cytotoxicity of these compounds are related to concentration and time. On the other hand، each agent could induce cytotoxicity in CHSE-214 based on concentration and it is different between these compounds. The results of this study showed that beta glucan، levamisole and lactoferrin have minimal effects but ethanol extract of propolis could cytotoxic at higher concentrations.