عنوان مقاله :
كلونينگ، بيان و بهينه سازي محيط جهت بيان آنزيم فيتاز آسپرجيلوس نايجر در ميزبان هانسنولا پلي مورفا
عنوان به زبان ديگر :
Cloning, expression and culture optimization of gene encoding Aspergillus niger NRRL3135 phytase in Hansenula polymorpha host
پديد آورندگان :
برجيان، محمدتقي دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي , رعنايي سيادت، اميد دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي , هراتي، جواد دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي , نيكزاد جمناني، فرناز دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي , يوسفيان، شيرين دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي , مرادي، سهراب دانشگاه شهيد بهشتي - دانشكده مهندسي انرژي و فناوري هاي نوين - گروه بيوتكنولوژي - آزمايشگاه نانوبيوتكنولوژي
كليدواژه :
فيتاز , بهينه سازي محيط كشت , هانسنولا پلي مورفا
چكيده فارسي :
سابقه و هدف: آنزيم فيتاز توانايي تبديل فيتيك اسيد به ميواينوزيتول و فسفات معدني را دارا مي باشد، از اين رو به صورت گسترده اي به عنوان يك افزودني در غذاي حيوانات تك معده اي اضافه مي گردد.هدف اين تحقيق، كلونينگ، بيان و بهينه سازي محيط براي بيان آنزيم فيتاز آسپرجيلوس نايجر در ميزبان هانسنولا پلي مورفا بود.
مواد و روش ها: در اين تحقيق، جهت دست يابي به مقادير بالاي توليد پروتئين، توالي ژن آنزيم فيتاز گونه Aspegillus niger NRRL3135 پس از بهينه سازي كدون براي ميزبان بياني Hansenula polymorpha، به آن انتقال يافته و فعاليت ويژه آنزيم در محيط هاي بياني مختلف برررسي شد.
يافته ها: نتايج به دست آمده در كشت فلاسك، توليد 1185U/L آنزيم فيتاز نوتركيب با فعاليت ويژه 34.84U/mg را در محيط بياني YNB-methanol نشان داد.
نتيجه گيري: محيط بياني YP-methanol را به عنوان يك محيط كارامد جهت توليد آنزيم فيتاز A. NigerNRRL 313 در ميزبان بياني H. polymorpha، در مقياس صنعتي نشان مي دهد.
چكيده لاتين :
Introduction: Phytase is able to change phytic acid into the myo-inositiol and inorganic phosphate, so it has been used as a cereal food additive in monogastric animal’s food. The aim of this study was to eamine cloning, expression and culture optimization of gene encoding Aspergillus niger NRRL3135 phytase in Hansenula polymorpha host.
Materials and Methods: In this study, in order to achieve high level production of protein, the sSequence of protein encoding fangal Aspergillus niger NRRL3135 phytase was designed according to the expression cod on usage of Hansenula polymorpha and transformation was done. The enzyme specific activity in different cultures was survived.
Results: The results in flask culture showed that the recombinant phytase production was 1185 U/L with 34.84 U/mg specific activities in YNB-Methanol culture.
Conclusion: Results indicate YP-methanol culture is the efficient culture to produce Aspergillus niger NRRL3135 phytase in Hansenula polymorpha as a host on industrial scale.
