شناسايي جنس (Lydia (Brachyuran: Oziidae براساس مطالعات مولكولي و فراساختاري اولين گونوپود جنس نر

Identification genus Lydia (Brachyura: Oziidae) based on molecular and ultrastructure studies of the first male gonopod

جنس Lydia متعلق به زيرشاخه سخت پوستان و رده خرچنگ هاي حقيقي مي باشد. تنها گونه اي از آن كه در خليج فارس يافت شده است Lydia tenax نام دارد. از آن جايي كه در قلمرو دريايي گونه هاي شناسايي نشده به وفور وجود دارند روش شناسايي سنتي مبتني بر ويژگي هاي مورفولوژيك شناسايي آن ها را با مشكل مواجه مي كند. اخيرا ژن COI براي شناسايي و تعيين حد و مرز گونه اي كاربرد فراواني دارد به همين منظور از نشانگر مولكولي ژن COI و هم چنين فراساختار اولين گونوپود جنس نر استفاده شد براي اين كه احتمال وجود گونه هاي مخفي در ميان 3 مورفوتايپ اين گونه نشان داده شود. بنابراين از گونه منسوب به Lydia tenax از سواحل صخره اي استان بوشهر نمونه برداري انجام شد. سپس اولين گونوپودهاي جنس نر، جداسازي شده و با ميكروسكوپ الكتروني اسكنينگ (SEM) مورد عكس برداري قرار گرفتند. جهت مطالعات مولكولي DNA نمونه ها با استفاده از روش فنل-كلروفروم استخراج و قطعه ژني زير واحد يك سيتوكروم اكسيداز ميتوكندري (COI) تكثير و توالي يابي شد. نتايج مطالعه حاضر نشان داد توالي نوكلئوتيدي اين قطعه ژني ميتوكندريايي (COI) در نمونه هاي مورد بررسي يكسان نيست و از اين 3 مورفوتايپ نمونه Lydia sp. FCH با بقيه مورفوتايپ ها تفاوت بيش تري را نشان داد و در كلادي جداگانه قرار گرفت. مطالعه دقيق فراساختار اولين گونوپود جنس نر در 3 مورفوتايپ، نيز تفاوت هايي را در قسمت راسي نشان داد. بررسي حاصل نشان داد، زماني كه تشخيص گونه ها به دليل شباهت هاي زياد مورفولوژي مشكل است، بررسي هاي فراساختار اولين گونوپود جنس نر و شناسايي براساس ژن COI در تفكيك گونه ها سودمند خواهد بود.

Lydia genus belongs to the sub kingdom crustaceans and the class of true crabs. Lydia tenax is The only species from Lydia genus that was found in the Persian Gulf. since in the maritime domain there are a lot of undescribed species so the traditional identification methods based on morphological characteristics is difficult to identify them. The COI gene to identify and determine the limits to species widely used. for this purpose، molecular marker COI gene and ultrastructure first male gonopods was used for the possibility of hidden species among 3 morphotype is shown for this species. therefore sampling from this species were donefrom rocky shores along Bushehr province. then the first male gonopods was separated and photographed by scanning electron microscopy (SEM). for molecular studies samples of DNA extracted by using phenol-chloroform and mitochondrial cytochrome oxidase subunit gene segment (COI) was PCR and sequenced. the results of present study showed that the nucleotide sequence of the mitochondrial gene fragment (COI) is not identical in all samples examined and from these 3 morphotypes، Lydia sp.FCH species was more different with other morphotypes and it was placed in a separate clade. ultrastructure study of the apical part of the first male gonopods showed that there are differences in the apical part of 3 morphtypes. what was obtained from this study showed that It is very important to investigate the first male gonopod and COI gene in separation of species since، identification of species is difficult for many similarities morphology.