اثر مهاري كروسين بر ملانوژنز در سلول هاي رده ملانوماي موشي B16F10

The Inhibitory Effect of Crocin on Melanogenesis of B16F10 Melanoma Cell Line

مقدمه: زعفران در طب سنتي كاربردهايي همچون ضد اسپاسم و آرام بخشي دارد. هدف از مطالعه حاضر، بررسي خواص ضد ملانوژنز و آنتي اكسيدان يكي از تركيبات موثره زعفران (كروسين) بر روي دودمان سلولي ملانوماي موشي B16F10 است. روش بررسي: در انجام اين پژوهش تجربي آزمايشگاهي، سلول هاي ملانومايي از بانك سلولي پاستور تهيه، در محيط كشت داراي %10 سرم جنين گاوي همراه %1 آنتي بيوتيك در 37 درجه سانتي گراد كشت شدند. درصد بقا سلولي پس از تيمار با غلظت هاي كروسين (16، 8، 4، 2، 1 ميكروگرم بر ميلي ليتر) ارزيابي و اثرات مهاري كروسين بر ملانوژنز توسط آزمون تيروزيناز قارچي، تيروزيناز سلولي، سنتز ملانين و اثر آنتي اكسيداني توسط روش فلوريمتري اندازه گيري شد. داده هاي كمي توسط آزمون ANOVA، آزمون Tukey در سطح p<0.05 تحليل شدند. نتايج: يافته ها نشان داد غلظت هاي 1 تا 16 ميكروگرم كروسين سميت چشمگيري بر سلول هاي ملانومايي نداشت، به علاوه فعاليت تيروزيناز قارچي (p?0.001)، فعاليت تيروزيناز سلولي و محتواي ملانين در يك روش وابسته به دوز در سلول هاي B16F10 كاهش يافت. كاهش راديكال آزاد در سلول هاي ملانومايي تيمار شده نشان داد اين تركيب در غلظت هاي 4 و 8 ميكروگرم و در غلظت 16 ميكروگرم معني دار هستند و داراي ظرفيت آنتي اكسيداني است. نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه كروسين به عنوان عامل مهاركننده ملانوژنز در سلول هاي B16F10 مطرح بوده و مي تواند به عنوان يك تركيب سفيدكننده پوستي پيشنهاد شود.

Introduction: Saffron has some applications such as anti-spasmodic and analgesic effects in traditional medicine. The aim of this study was to evaluate the anti melanogenesis and antioxidant properties of crocin (one of the saffron active components) on B16F10 mouse melanoma cell line. Methods: In this experimental study, B16F10 cells were prepared from Pasteur Institute (NCBI) and were grown in medium containing 10% FBS with 1% antibiotics at 37° C.Then, the cell viability was assessed, the inhibitory effect of crocin on melanogenesis was investigated by fungal tyrosinase,and tyrosinase activity assessment, melanin synthesis and cellular antioxidant capacity was evaluated after treatment with various concentrations of crocin (1, 2, 4, 8, 16 μg/ ml) by DCFDA assay. Quantitative data were analyzed using SPSS software, one way ANOVA, Tukey test at p ≤0.05. Results: The data revealed no significant cytotoxicity of crocin(p>0.05) (concentrations of 1-16 μg/ ml) on B16F10 cells, in addition, fungal tyrosinase activity (***p≤ 0.001), intracellular tyrosinase activity (*p< 0.05, **p≤ 0.01) and melanin content (*p< 0.05, **p≤ 0. 01 , ***p≤ 0.001) have suppressed in a dosedependent manner. Further, reduction of free radicals in treated melanoma cells exhibited that crocin in concentrations of 4and 8 μg/ ml in p<0.05 and-16 μg/ mlin p≤ 0.001 possess significant antioxidant efficacy. Conclusion: Our results elucidated that crocin was proposed as melanogenesis inhibitor in B16F10 cells, which can be considered as an effective whitening agent.