مقايسه پاسخ هاي ايمني همورال متعاقب تجويز آنتي ژن نوتركيب ESAT-6/CFP-10 مايكوباكتريوم توبركلوزيس در سه مسير مختلف

Evaluation of three different administration routes (IM, SC and IN) on humoral immune responses against Mycobacterium Tuberculosis ESAT-6/CFP-10 fusion protein

مقدمه: بيماري سل به عنوان يكي از معضلات بهداشتي قرن حاضر محسوب مي شود. واكسن BCG به عنوان تنها واكسن موجود عليه اين بيماري مي باشد كه پاسخ هاي محافظتي آن تغييرات فراواني را به همراه دارد. به همين دليل، مطالعه در مورد ايجاد و توسعه واكسني جديد عليه توبركلوزيس، از موضوعات نوين تحقيقاتي است. در اين مطالعه تاثير مسيرهاي تجويز، درون بيني، زيرجلدي و داخل عضلاني بر ايجاد ايمني همورال محافظتي عليه آنتي ژن نوتركيب ESAT6/CFP-10 توبركلوزيس مورد بررسي قرار گرفت. روش بررسي: در ابتدا آنتي ژن نوتركيب ESAT6/CFP-10 مورد ارزيابي اوليه و تاييد قرار گرفت. آنتي ژن فوق در سه مسير درون بيني، عضلاني و زيرجلدي، درسه مرحله وبه فواصل زماني دوهفته اي، همراه با يا بدون ادجوانت به موش هاي Balb/C تجويز شدند. براي مسيرهاي تجويز عضلاني و زيرجلدي، ادجوانت MF59 و براي مسير تجويز درون بيني از ادجوانت CTB استفاده شد. 10 روز پس ازهر تجويز، از وريد اربيتال چشمي موش ها خون گيري به عمل آمد و ميزان آنتي بادي اختصاصي عليه آنتي ژن فوق به روش الايزا مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج: نتايج نشان دادند كه موش هاي واكسينه با آنتي ژن نوتركيب در مقايسه با گروه هاي كنترل، تيتر آنتي بادي اختصاصي بالاتري دارند. اگرچه مسيرهاي تزريق زيرجلدي و داخل عضلاني هر دو به سرعت قادر به ايجاد پاسخ ايمني مناسبي بودند اما پاسخ ايمني ايجاد شده از مسير درون بيني نيز به تدريج افزايش داشت تا به مقادير قابل قبول رسيد. نتيجه گيري: نتايج بدست امده از اين تحقيق مي تواند در فرمولاسيون واكسن هاي مخاطي نوتركيب برعليه بيماري سل مورد استفاده قرار گيرد

Introduction: Tuberculosis (TB) has been considered as a main health problems of the present century. Unfortunately، it has been reported different protective responses against BCG vaccine، as only available vaccine against TB .The search for a new and improved vaccine against tuberculosis is currently a very active field of research. In this study، we have evaluated the relative effects of intranasal (i.n)، subcutaneous (s.c) and intramuscular (i.m) routes of immunization on the induction of humoral immune responses against TB recombinant protein. Methods: The recombinant ESAT-6/CFP-10 antigens has been assessed and confirmed preliminary، for this study. The Balb/C mice were immunized in 3 different routes، three times at 2-week intervals with recombinant protein، formulated with or without adjuvants (MF-59 for the i.m and s.c routes and CTB for i.n). Blood was collected from retro-orbital sinus 10 days after each immunization and after separation of sera، they were evaluated for specific antibodies against antigen by an indirect ELISA method، which had set up during the research. Results: Mice vaccinated against recombinant proteins had high level of specific antibodies compared to the controls. Our results showed that although the i.m and s.c injections also induce immune responses، but the antibody titer in i.n rout had graduately elevated to reach in acceptable levels. Conclusion: The results could be used for formulation of mucosal vaccines against tuberculosis in future studies.