ارزيابي اثرات miR-143 ليپوزومه بر زيست پذيري سلولي و بيان ژن آنتي آپوپتوتيك Bcl-2 در سلول هاي استئوساركوماي انساني جهت اثر گذاري بردرمان سرطان هاي متاستاتيك

Evaluation of the effect of liposomal miR-143 on cell viability and anti-apoptotic gene expression of Bcl-2 in human osteosarcoma cells for the treatment of metastatic cancers

مقدمه:مطالعه حاضر به منظور ارزيابي اثر mir143 بر بيان ژن bcl2 در سطح mrna و همچنين سميت سلولي در رده سلولي saos2(از رده هاي استئوساركوما) و hum 63 (سلولهاي سالم استخوان) انجام گرفت.روش بررسي:در مطالعه تجربي حاضر براي انتقال mir143 به داخل سلول هاي سالم و سرطاني استخوان جهت بررسي اثرات آن بر روي بيان ژن bcl2 از ليپوزوم كاتيوني ليپوفكتامين 2000 استفاده شد سپس اثرات mir143 بر روي سميت سلولي (72 ساعته) و بيان ژن bcl2 به ترتيب به وسيله تست هاي mtt و پروتكل realtimepcrسنجيده شد. از نرم افزار spss و آزمون هايanova و student ttest براي آناليز آماري نتايج آزمايشات و ارزيابي آنها استفاده شد.نتايج نتايج نشان داد كه سامانه ليپوفكتامين 2000 به تنهايي هيچ سميتي در هر دو رده سلولي hum63 وsaos2 نداشت. سلول هاي سرطاني saos2 نسبت به سلول هاي hum63 حساسيت بيشتري در مقابل mir143 آزاد وlipo/mir143 از خود نشان دادند. بيشترين كاهش در سلول هاي saos2بعد از تيمار با lipo/mir143 مشاهده شد (p<0/05). همچنين مطابق نتايج، ترانسفكشن سلولي mir143 توسط ليپوفكتامين 2000 در مقايسه با تيمار سلول ها با mir143 آزاد، باعث كاهش معني داري در بيان ژن bcl2 شد (p<0/05).نتيجه گيري:سامانه ليپيدي ليپوفكتامين 2000 مي تواند در جذب سلولي mir143 موثر واقع شود. mir143از طريق هدف قرار دادن مسيرهاي سلولي مختلفي از جمله ميزان بيان ژن bcl2 مي تواند در مسير درماني سرطان استخوان (استئوساركوما) موثر واقع شود.

Introdution: The present study was conducted to evaluate the effect of miR-143 on the expression of Bcl2 gene at the level of mRNA، cell cytotoxicity in the SaOs-2 cell line (Osteosarcoma) and Hum 63 (Human primary bone cells). Methods In this experimental study، miR-143 was introduced into the SaOs-2 and Hum 63 cell by the lipofectam 2000 system. Then، the effects of miR-143 on cytotoxicity (72 hours) and expression of Bcl2 gene were measured by the MTT tests and Real Time Pcr protocols، respectively. Results The results showed that the lipofectamine 2000 system had no toxicity in both Hum63 and SaOs2 cell lines by itself. SaOs2 cancer cells were more susceptible to miR-143 and Lipo / miR-143 compared to Hum63 cells. The highest reduction in SaOs2 cells was observed after the treatment with Lipo / miR-143 (p <0.05). Furthermore، according to the results، transfection of miR-143 by lipofectamine 2000 into the cell، compared to cell-treated alone by miR-143، significantly reduced Bcl2 expression (p <0.05). Conclusion The lipoprotein 2000 system can be effective in absorbing miR-143 into the cells. By targeting various cellular pathways، including the expression level of the Bcl2 gene، miR-143 can be effective in the treatment of bone cancer (Osteosarcoma)