بررسي اثر متابوليت هاي توليدي سويه بومي Pseudomonas sp UW4 بر بيان ژن p53 در رده سلولي SK-BR-3 سرطان پستان انسان

Survey the effect of produced metabolites by native Pseudomonas sp. UW4 on p53 gene expression in SK-BR-3 breast cancer cell line

مقدمه: با توجه به مشكلات در حال توسعه مسموميت سيستميك و مقاومت دارويي در شيمي درماني، كشف تركيبات فعال زيستي و ضد سرطاني جديد بسيار ضروري است. بنابراين در اين مطالعه به بررسي فعاليت ضد سرطاني متابوليت توليدي سويه بومي pseudomonas sp. uw4 در جهت شناسايي تركيبات جديد پرداخته شد.روش بررسي: مطالعه حاضر به صورت تجربي از ارديبهشت 1394 تا شهريور 1394 در دانشگاه آزاد اسلامي شهركرد انجام شد. ابتدا سلول هاي سرطان پستان انسانsk-br-3 با غلظت هاي مختلف (5، 10 و 20 ميلي گرم/ميلي ليتر) به مدت 24 و 48 ساعت با متابوليت توليد شده توسط سويه بومي pseudomonas sp. uw4 تيمارشدند و ميزان بقاء سلولي با روش رنگ سنجي mts مورد بررسي قرار گرفت. سپس بيان ژن p53 با استفاده از روش rtreal time -pcr بررسي شد. جهت آناليز آماري، از نرم افزار 16spss و آزمون آماري anova يك طرفه استفاده شد.نتايج: تيمار با متابوليت توليدي سويه بومي pseudomonas sp. uw4 ، نشان داد با افزايش غلظت به صورت وابسته به دوز و زمان، توان زيستي سلول ها كاهش پيدا كرده است، به طوري كه بيشترين تاثير مربوط به غلظت 20 ميلي گرم/ميلي ليتر و در زمان 48 ساعت پس از تيمار سلول ها بود. هم چنين افزايش بيان ژن p53 به ويژه در غلظت هاي 10 و 20 ميلي گرم/ميلي ليتر بعد از 24 ساعت و در غلظت هاي 5، 10 و 20ميلي گرم/ميلي ليتر بعد از 48 ساعت مشاهده شد (p<0/05). نتيجه گيري: مي توان از متابوليت توليد شده توسط سويه بومي pseudomonas sp. uw4 در درمان سرطان پستان sk-br-3 استفاده كرد.

Introdution: Regarding to the development the problems of systemic toxicity and drug resistance in cancer chemotherapy، the continuing discovery of new bioactive compounds and anticancer agents is very necessary. Therefore، in this study، we checked the anticancer activity of native Pseudomonas sp. UW4 metabolite to find new compound. Methods This experimental study was performed in Shahrekord Islamic Azad University from April 2015 to August 2015. First SK-BR-3 human breast cancer cells with different concentrations (5، 10 and 20 mg/ml) were treated with produced metabolite by native Pseudomonas sp. UW4 for 24 and 48 hours. Cell viability was assessed by MTS assay. Then، p53 expression was detected by RT-Real Time PCR. For statistical analysis، SPSS16 software and one way ANOVA test were used. Results Treatment with produced metabolite by the native Pseudomonas sp. UW4 showed the decreases the viability of cells in a time and dose dependent manner، the most effective concentration of this substance was 20 mg/ml and 48 h after treatment. Also، an increase in p53 gene expression، significantly in 10 and 20 mg/ml after 24 h and 5، 10 and 20 mg/ml after 48h was observed (P<0.05). Conclusion Produced metabolite by native Pseudomonas sp. UW4 could be used for treatment of SK-BR-3 breast cancer