شناسايي توليد بتالاكتاماز در استافيلوكوكوس ارئوس جدا شده از پلاك هاي دنداني انسان با روش هاي يدومتري و مولكولي

Detection of betalactamase production among Staphylococcus aureus isolated from human dental plaques using iodometric and molecular methods

مقدمه: مقاومت نسبت به پني سيلين در ميان سويه هاي استافيلوكوكوس ارئوس بسيار گسترده مي باشد. يكي از مهم ترين سازوكار هاي بروز مقاومت نسبت به پني سيلين در استافيلوكوكوس ارئوس توليد بتالاكتاماز مي باشد. شناسايي توليد بتالاكتاماز توسط روش هاي مختلفي مانند روش هاي انتشار ديسك، يدومتري، اسيدومتري و مولكولي امكان پذير مي باشد. هدف از اين مطالعه شناسايي توليد بتالاكتاماز توسط استافيلوكوكوس ارئوس هاي جدا شده از پلاك هاي دنداني انسان توسط روش هاي مختلف يدومتري و مولكولي مي باشد. روش بررسي: در اين مطالعه مقطعي چهل نمونه پلاك دنداني انساني با استفاده از فورسپس استريل جمع آوري شد. شناسايي و جداسازي استافيلوكوكوس ارئوس در نمونه هاي مزبور توسط آزمون هاي هاي بيوشيميايي و تكنيك مولكولي pcr صورت گرفت. سپس الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي استافيلوكوك هاي مورد مطالعه با روش كربي بوئر تعيين شد. همچنين توليد بتالاكتاماز توسط باكتري هاي مورد مطالعه توسط آزمون هاي يدومتري و مولكولي عرض يابي گشت. نتايج بدست آمده توسط آزمون آماري آنوا و نرم افزار spss15 مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت.نتايج: (12)30% از نمونه هاي مورد مطالعه حاوي استافيلوكوكوس ارئوس بودند. تمامي سويه هاي استافيلوكوكوس ارئوس توليد بتالاكتاماز را توسط روش يدومتري با استفاده از فيلتر كاغذي داشتند. همچنين كليه سويه ها حاوي ژن blaz بودند كه توسط واكنش زنجيره اي پليمرازشناسايي قرار گرفت. نتايج آزمون سنجش مقاومت آنتي بيوتيكي به روش كربي بوئر نيز حاكي از مقاومت 100% سويه ها نسبت به پني سيلين بود.نتيجه گيري: نتايج مطالعه حاضر نشان داد كه روش هاي مولكولي (pcr)و يدومتري (روش فيلتر كاغذي) توانايي تشخيص دقيق تر استافيلوكوكوس ارئوس هاي مقاوم به پني سيلين را دارا مي باشند.

Introduction: Resistance to penicillin among Staphylococcus aureus species is very widespread. One of the most important resistance mechanisms toward penicillin in S. aureus is blaZ production. Detection of beta lactamase production is possible using different methods like disk diffusion، iodometric، acidometric and molecular (PCR) methods. The aim of this study was to detection of beta lactamase production among S. aureus isolated from human dental plaque using iodometric and molecular methods. Descriptive statistics were done using ANOVA test and the statistical package، SPSS، Version 15.0. Methods: In this cross sectional study، 40 samples of human dental plaques was collected through forceps. Identification and isolation of S. aureus from samples was carried out using cultural methods، biochemical and molecular tests. Then، antibiotic resistance patterns of studied Staphylococci were determined using Kirby-Bauer method. Also، betalactamase production among the bacteria was evaluated using different iodometric and molecular methods. Results: 30% (12) of studied samples contained Staphylococcus aureus. All Staphylococcus aureus strains had beta lactamase production ability using filter paper iodometric method. Also، all spesies had blaZ gene، which detected by polymerase chain reaction test. The results of Conclusions: The result of this study showed that molecular (PCR) and iodometric (filter paper) methods were more accurate in detection of penicillin resistant S. aureus.